单胞藻培养.ppt

第四节 单细胞藻类的培养方式和设备 1、培养方式 按培养的场所分室内培养和室外培养 按培养基的形态分固体培养和液体培养 按培养的纯度分纯种培养和单种培养 按藻液的流动情况分静止培养和循环流动水培养 按气体交换情况分充气培养和不充气培养 按采收方式分一次培养、连续培养和半连续培养 按藻液与外界接触程度分封闭式培养和开放式培养 按培养规模和目的分小型培养、中继培养和大量培养 （1）纯培养和单种培养 纯培养（axenic culture）：是无菌培养，指排除了包括细菌在内的一切生物的条件下进行的培养。 纯培养操作要求十分严格，要求有无菌室、超净台等设备，容器、工具、培养液等均须彻底灭菌。培养成功率很高，是进行科学研究不可缺少的技术。 单种培养（single-species culture）：指区别于纯培养的不排除细菌存在的培养（可以是生产性的，也可以是非生产性的） （2）封闭式培养和开放式培养 封闭式培养（closed culture）：指把培养液密封在透明的容器中，与外界空气隔离，暴露在阳光中，CO2完全采用人工供给的方法。 封闭式循环培养装置，封闭培养瓶等； 我国生产上常应用封闭式塑料薄膜袋培养，方法简单，成本低、培养的藻细胞密度大，不易污染且生产周期短，效果很好，目前在生产上应用很多。 开放式培养：指把藻类培养在开敞容器中，如广口玻璃瓶、水族箱、玻璃钢水槽、水泥池等。 一般是在水泥池中，是目前培养单胞藻的主要方式。因光照充足、通风较好，藻细胞生长繁殖迅速，但与外界接触面大，易污染。 封闭式薄膜装置 （3）一次培养、半连续培养和连续培养 一次培养（batch culture）：又称有限培养（culture of limited volume），是在一定的容器中，接入少量藻种，在适宜的环境条件下培养，待藻细胞达到一定的密度后，便一次性采收或进一步扩大培养。 一次性培养是单细胞藻类培养中最常用的方法。 半连续培养（semi-continuous culture）：又称间收培养。是在一次性培养的基础上，当培养的藻液达到一定密度后，每天采收一部分，并加入新的营养液，继续培养。 半连续培养是生产上单胞藻大量培养中常用的方法，每天的收获量根据需要及藻液的生长情况而定。 连续培养（continuous culture ）：是在培养容器内，新的培养液不断流入，达到一定密度的培养液不断流出。培养液的流入量和流出量可根据微藻的生长情况及需要进行人为控制，保持平衡。 一般在在室内进行，采用自动控温、人工光源、封闭式通气培养。在培养过程中，营养物质浓度和藻类细胞密度相对稳定，环境因子变化较小。 连续培养可通过人为调节，始终控制藻类的生长在指数生长期，大大提高生产效率，产量高，但要求较高的自动化程度和较复杂的和生产设备。 连续培养在国外应用较多，我国目前应用很少。 国外连续培养两种最普通的方式为“恒浊器”和“恒化器”。 恒浊器是人为确定藻液收获密度，由光电仪器自动监测，当培养容器中藻细胞超过规定数值，藻液自动流出，新培养液同时流入，自动化仪器不断调整流出率，保持藻液细胞密度相对稳定； 恒化器是以一种重要的营养物质（如硝酸盐）的浓度为指标，当这种营养物质的浓度降到某一水平时，收获一定量的藻液，同时加入等量的含有一定数量的营养物质的培养液，保持培养容器中藻细胞生长率的稳定。 （4）小型培养、中继培养和大量培养 小型培养：又称保种培养或一级培养，目的是培养和供应藻种（进行纯藻种的分离、培养、保存和开展科学研究等）。一般采用封闭式不充气一次性培养方式，培养容器一般采用100～3000ml的三角烧瓶。 中继培养：又称二级培养，目的是藻种扩大培养，供应生产性大量培养的藻种。一般在室内大的玻璃容器或塑料大袋中进行。根据需要可分为一级中继培养和二级中继培养。 一级中继培养常用10～20升的细口瓶、大口玻璃瓶或钢桶、鱼苗袋等，封闭或开放，充气或不充气，一次性培养方式。 二级中继培养一般为0.2～0.4m3的水族箱，0.5～1.0m3的玻璃水槽、水泥池或塑料薄膜袋等，开放式充气一次性培养方式。 大量培养：也叫生产性培养或三级培养，目的是为培养动物提供大量单胞藻饵料。 有室内和室外两种。 目前主要采取室内、开放式、通气、一次性或半连续培养法，培养容器有大型玻璃钢水槽、大型水泥池或塑料薄膜袋等（也有用土池）。 2、培养设备与设施 单胞藻培养设备与设施主要包括： 工作室 培养容器 培养室与培养池 水处理系统 充气系统 （1）工作室 工作室是饵料培养工作人员进行单胞藻培养经常性工作的地方，常位于车间的一端。 工作室配备显微镜、常用仪器、工具、试剂、药品、肥料等； 工作室附设一保种间和一清洗消毒间。 保种间主要进行藻种的分离、保存和培养等工作，面积视培养规模而定，一般为10～20