兔VX2肿瘤淋巴转移动物模型简易法建立和病理学观察.pdfVIP

中国西部第八届实验动物管理与学术研讨会暨四川省第二届实验动物学术年会 l乙06 兔VX2肿瘤淋巴转移动物模型 简易法建立和病理学观察 刘学旭1，王建2，杨文1，丁运萍3 (1．四川大学实验动物中心，成都610041；2．四川省肿瘤医院，成都610041；3．1：3腔疾病研究 国家重点实验室(四川大学)) 摘要：日的探索肌肉注射细胞悬液建立VX2淋巴癌转移模型的方法。方法24只新西兰白兔随机分成 模型组和对照组，模型组14只，对照组10只。模型组在兔又股二头肌肌腹中部注射VX2细胞悬液0．5ML， 对照组在相同位置注射0．5ml生理氯化钠溶液。观察淋巴结的变化，第28天处死动物，病理学观察肿瘤大小、 形态及组织学改变。结果模型组14只动物全部成瘤，成瘤率100％。胭窝淋巴结明显肿大。病理检查显示， 其淋巴结可见大量癌细胞，淋巴结的正常结构完全被破坏，甚至消失。转移率100％。结论肌肉注射VX2组 织悬液能建立胭窝淋巴结癌转移动物模型，方法简便易行，模型稳定，转移率高，该模型动物体形较大， 淋巴结浅而大，对实验性癌淋巴转移的研究具有重要意义。· 关键词： 淋巴结转移；VX2肿瘤；动物模型 肿瘤淋巴结转移动物模型是研究肿瘤经淋巴管转移的有力工具，文献报道肿瘤淋巴 结转移动物模型较少，且多为小动物，如小鼠，动物荷瘤生存期短，淋巴结小，操作难度大， 因此实用价值较低。本实验采用兔VX2肿瘤肌肉接种法成功建立兔胭窝淋巴结转移转移模 型，方法简单，动物个体适中，淋巴结较大，部位固定，位置浅，具有较高的实用价值。 1材料与方法 1．1材料 1．1．1实验动物一级新西兰兔24只，雌雄皆有，体重2kg左右，动物质量一级，饲养条件一 级。由四川大学实验动物中心提供。 1．1．2 VX2荷瘤种兔，由四川大学实验动物中心提供。 1．2方法 1．2．1细胞悬液的制备取传代中肝VX2荷瘤种兔一只，按1．5ml／kg体重速眠新肌肉注射麻 醉，仰卧固定，去除上腹部被毛后，将种瘤兔放于超净工作台中，消毒，铺单，剑突下2cm，偏右侧 lcm纵行切开约2-3cm切口，暴露肝脏，取肿瘤组织，置于无菌平皿中，迅速移开荷瘤兔，用无菌 生理氯化钠冲洗，去掉坏死组织、肝组织，采生长旺盛呈鱼肉样组织，匀浆后用3倍量WⅣ 生理氯化钠溶液稀释，即得VX2肿瘤细胞悬液。 1．2．2接种方法用lml一次性注射器装上7号注射针头，吸取VX2细胞悬液，在兔右后肢 外侧股二头肌肌腹中部碘伏消毒，肌肉注射接种VX2细胞悬液0．5ml。 1．2．3饲养管理实验兔饲养在一级饲养条件下，独笼饲养，饲喂兔全价颗粒饲料(由四川大学 实验动物中心生产)，自由采食、饮水。 1．2．4所有动物肿瘤接种第28d，耳缘静脉空气栓塞处死，取右胭窝淋巴结，称重，10％中性福尔 吗林固定，常规脱水，石蜡包埋，切5pm厚切片，HE染色，光镜观察。 2．结果 2．1VX2肿瘤移植成功率实验显示：生理氯化钠细胞悬液注射接种，肿瘤模型接种成功率为 100％。 2．2右胭窝淋巴结变化接种肿瘤20天，触摸右侧胭窝淋巴结明显肿大。第28d解剖观察， 肿瘤兔右胭窝淋巴结表面凹凸，血管丰富，多呈球形：空白对照组右胭窝淋巴结表面光滑， The8thCWULAS 2ndSALASAnnual CongressThe Meeting 乳白色，多呈扁椭圆形【图d】，右胭窝淋巴结质量模型组明显大于对照组(P0．01)。 2．3右胭窝淋巴结的病理学检查光镜下观察，模型组可见体积较大，呈圆形、梭形或不规 则形，胞浆少。核大、染色深，可呈分叶，多核状的异性的癌细胞【图b】，与VX2原位肿瘤组 织观察一致【图a】。14R模型动物全部发生VX2肿瘤胭窝淋巴结转移，转移率100％，结果见下 表。 右胭窝淋巴结重量级及转移情况 组别 动物只数(只) 转移率(％) 淋巴结重量(g)转移数(只) 模型组 14 1．3585士0．4530※14 100 对照组 10 0．3l16=L-O．0742 - - 3讨论 VX2肿瘤细胞株起源于shop