实验七食用菌母种的扩大培养.docVIP

实验七 食用菌母种的扩大培养 一、实验目的 学会母种培养基的配制方法，掌握母种转管继代培养技术，了解食用菌母种制作的工艺流程和制作母种的基本技能。二、实验原理孢子分离、菇木分离母种的扩大培养是一支母种接培养成若干支母种的过程三、实验所需菌种：平菇、、等。 ：马铃薯、葡萄糖、琼脂、酵母膏、75%酒精等。 仪器：、试管（18×180mm）、棉花、高压灭菌锅、超净工作台、接种、酒精灯。四、实验内容 （一）母种培养基配制 （1）培养基配方培养基：马铃薯（去皮）200g、葡萄糖20g、琼脂20g、水1000ml、酵母膏2.5g。（2）培养基配制将马铃薯去皮洗净、挖去芽眼，称取200g，切碎，放入锅中清水加热煮沸，维持20min，煮至软而不烂为止。用双层湿沙布过滤，液再加入琼脂继续加热，待琼脂溶化后，添加及，补足水分至1000ml，搅拌均匀煮沸后准备装管。 （3）分装试管培养基配制后应趁热分装。装入培养基占试管的1/处，装管时勿使管内外壁沾上液，以免浸湿棉塞，污染。装管后塞上棉塞。棉塞大小、松紧度应适宜，以用手提棉塞试管不脱落为准。然后每7~10支试管扎成一捆，棉塞上方用报纸包好，避免灭菌时被水蒸汽浸湿。 （4）灭菌（卧式高压蒸汽灭菌锅）灭菌前将水加至水位标记。将试管放入锅内，关上门，14Mpa，12灭菌结束后打开排气阀，待压力表指针自然回位时，排出锅内剩余蒸汽后打开门。注意切忌在压力表未到位时就放汽以免试管内的培养基向上冲浸湿棉塞造成以后菌种的污染。 （5）摆斜面冷却后即成斜面培养基（二）接种（1）紫外杀菌接种前，把、接种工具放入超净工作台内，打开紫外灯照射30分钟以上。 （2）接种操作用75%酒精对手、接种工具进行消毒点燃酒精灯，火焰，接种接种完成后贴标签。（三）菌丝培养接种后置于25恒温箱中培养2~3天后可见块周围发生白色绒毛状菌丝此时每天要检查杂菌污染情况培养10~15天后菌丝可长满斜面。五、实验数据 六、实验总结