母血浆中游离胎儿DNA无创伤性产前诊断靶标.pdfVIP

中国优生与遗传杂志2007年第15卷第11期 ·5· 母血浆中游离II台Jt．DNA：无创伤性产前诊断的靶标 朱金玲1．■清云2．罗佳滨1 (1．佳本斯大学基础医学院生物教研室2．佳未斯大学基础医学院解剖教研室，黑龙江佳木斯154007) p 摘要：孕妇血策中游离胎儿DNA的发现，对无创铸性产前诊断产生了巨太的形响。近几年来，随着分子生物学技术 的完善，使得从母血中检测胎儿DNA井应用于临床成为可能，对游离胎儿DNA的生物化学性质的进一步研兜为无创伤性 产前基因诊断在临床的广泛应用奠定了基础。 美健词：游离胎儿DNA：母血泉；无创档性产前诊断 中图分类号：11714．5 文献标识码：A 文章编号：1006—9534(2007)11—0005—02 孕妇外周血中存在游离胎儿DNA已逐渐被世界许多学 养层细胞。 者证实。相对于完整细胞而言，孕妇血浆中的DNA较丰富， 有研究发现母血浆中游离胎儿核酸以凋亡小体的形式 且在妊娠第5周就可检出，且随孕周数的增加而升高。b等 存在”J，因此有人推测母血浆中游离胎儿DNA可能来源于 胎儿发育过程中各种凋亡的胎儿细胞。 认为母血浆游离胎儿DNA比完整细胞中提取的胎儿DNA 更有意义，其主要原因在于与完整细胞相比．游离胎儿DNA 另外．有趣的是有人在孕妇的其它体液包括羊水、尿液、 有较高的浓度，且分娩后母血浆中游离胎儿DNA迅速被清 脑脊液及腹膜腔发现有游离胎儿DNA，且羊水中的游离胎儿 除，不受以往妊娠的影响，假阳性率及低。因此，母血中胎儿 DNA的量是血液中的200倍，这导致人们推测胎儿DNA分 DNA以其无创伤性、安全、简便等特点被应用于产前诊断的 子是不是靠这种高浓度梯度直接通过胎盘或胎膜进入母血 许多方面，如性别鉴定、RhD血型鉴定、X连锁的单基因病的 中。总之，游离胎儿DNA来源是学者研究的热点。 检测、胎儿非整倍体及先兆子痫预测等的研究。然而，利用 2．游离胎儿DNA的化学性质 游离胎儿DNA进行无创伤性产前诊断在临床的广泛应用还 目前大多数学者致力于利用母血浆中游离胎儿核酸进 依赖于对胎儿DNA的生物、化学特性的研究，如核酸的来 行无创伤性产前诊断的研究。而对母血浆中游离胎儿DNA 源、产生和代谢机制以及游离胎儿核酸的化学性质、胎儿特 分子的化学特性研究及少，最近Chart等研究了孕妇血浆中 异性遗传标记等的研究。 胎儿和母亲的游离核酸的大小的分布，研究发现母血浆中游 1．母循环中胎儿DNA的来源 离的棱酸片段长于非孕妇的，且游离胎儿DNA片段比母亲 孕妇外周血中胎儿核酸的来源尚未阐明，目前对母血浆 游离DNA片段短．大部分游离胎儿DNA片段小于300bp。 中游离胎儿核酸的来源主要有三种假设，一是胎儿造血细胞 这一结果提示人们是否可根据DNA分子的大小来富集游离 不断地通过胎盘进入母体循环中，胎儿细胞被母体免疫系统 胎儿核酸，以增加其相对浓度。“等”’应用母血浆中DNA 识别为异物，并受到免疫系统的攻击，膜溶解，胎儿DNA进 分子大小的不同进行多态的研究，同时用Southern印记法证 入母血中；二是来源于胎盘；三是来源于各种凋亡细胞。 明了孕妇血浆中游离胎儿DNA具有凋亡小体的DNA特征 最初人们认为游离胎儿DNA来源于胎儿的造血细胞主 和属性。并进一步利用母亲及胎儿游离DNA大小的不同进 tandem廿 要是因为母循环中存在各种胎儿细胞。然而，母循环中胎儿 行胎儿DNA的分离，应用短串联重复序列(short 细胞的数量及少，不能合理的解释相对较丰富的游离胎儿 peat，STR)遗传标记进行21三体的非侵人性产前诊断的研 DNA的存在，研究发现随着孕龄的增加胎儿细胞数量与游离 究，