DDT对人滋养层细胞功能影响对映体选择性差异.pdfVIP

第四届全国环境化学学术大会论文集(上册) DDT对人滋养层细胞功能的影响的 对映体选择性差异譬 赵美蓉王鲁梅刘维屏 (浙江工业大学环境科学研究中心，生物与环境工程学院，杭州，310032) 摘要本文以人绒毛膜癌细胞系JEG．3为体外研究模型，以o,p’-DDT为研究对象，利用高效液相手性拆 7-DDT对映体标样，结合分子生物学实验技术研究了DDT及其对映体对JEG．3细胞激素分泌 分获得o,p 及其受体调节的影响。评价DDT对映体对滋养层细胞功能影响的对映体选择性差异。 关键词DDT；手性；滋养层细胞；胎盘发生 0 引言 o,p’-DDT是一种典型的手性持久性有机污染物(POPs)，在环境中广泛存在，对野生 动物和人体造成多种损伤，尤其影响生物体正常的生殖功能。而母胎健康是受全世界关注的 最重要的科学问题之一，现有的一些研究表明DDT及其代谢产物可能影响母胎，但是关于 手性POPs农药对人类母胎健康影响的对映体选择性差异至今未有报道。 本文以o,p’．DDT研究对象，以人绒毛膜癌细胞系JEG--3为体外研究模型，结合手性 拆分技术，研究了o,p’．DDT对胎盘发生过程中激素分泌和调节影响的对映体选择性差异， 为从对映体水平评价手性POPs对人口健康的影响提供科学资料。 1材料与方法 1．1 农药 仍p7一DDT(纯度99．9％)。所有药品均溶解于乙醇，溶剂终浓度O．1％。胎牛血清经过 活性炭／葡聚糖处理(CDFBs)，其余实验用药品及溶剂分别为细胞培养、色谱纯及分析纯。 1．2 JEG-3细胞的培养和处理 养瓶中培养244时后，加入Ⅸ)T及其对映体继续培养2天(处理前，细胞用实验用培养液(无 酚红的MEM培养液、添加2％CDFBS)代替，培养2天。 1．3 检测方法 常规的E：ELISA狈IJ定激素含量，荧光定量PCR级WesterBlot分子激素调节的相关分子的 变化。 2 结果与讨论 2．1 研p7-DOT的手性拆分 Chiral of 7-DDTonCHIRALCELOJ-H Fig．1 separation column o,p 251 第四届全国环境化学学术大会论文集(上册) 7-DDT在CHIRALCEL o,p OJ．H柱上达到基线分离，CD检测结果显示经过基线分离的 两个化合物具有相反的CD信号 2．2 D，p7-DDT对JEG一3细胞激素分泌影响的对映体选择性差异 孕酮在维持正常妊娠的过程中其重要的作用，而孕酮是通过孕酮受体接到的信号通路实 现其生理功能的。而外源的激素类似物可能感染孕酮的分泌并影响其功能。由Fig．2，3可 知，o,p 7．DDT高1倍左右； 表达；其中R．D，p’-DDT对JEG一3细胞中P4和PR的诱导作用交S．D，p 同时对HLA．G是由孕酮介导的下游分子，在妊娠期间主要调节妊娠免疫功能，对于正 常妊娠有重要意义，研究结果显示o,p’-DDT处理JEG．3细胞可以引起HLA．G表达的上调， 7．DDT要强，就有显著性差异(F弦4)。 同时R-o,p’-DDT的这种作用较S．DJp 3 2 2 5 I6 2 I 2 l5