固氮溶磷细菌之特性的研究.pdfVIP

固氮溶磷细菌之特性研究 杨秋忠张芝贤荆瑞美许秋燕 (中*太学土壤环境科学系) 刖 茜 农地中豆科与根瘤菌之共生性固氮作用每年可固定相当可观的氮素量，甚至每公顷高 etal‘，1983)，根瘤菌的应用可以减少或代替部份的氮肥施用， 达300kg以上的氮素(Boihe 因而可以降低土壤及地下水被化学肥料污染之可能性，所以生物固氮作用在农业生产中均 被认为占有相当重要的地位(杨，1997)。但一般根瘤菌与豆科植物间的共生固氮作用有其专 一性，以致应用范围仅限于豆科，另外之固氮溶磷细菌则亦兼具固氮及溶磷能力。在固氮溶 磷细菌之生理生化特性研究上，本实验室主要研究其溶磷能力、细菌分泌物中有机酸的种类 及浓度、对抗生素之抗药性、亲缘关系及生物分析，并进行玉米在砂土杯栽之试验，及田闻之 豆种与非豆科试验，研究接种圃氮溶磷细菌后，对玉米根圈菌数的变化，及溶磷固氨细菌与 宿主植物间的专一限制。 材料与方法 Rao，1982)，接种不同之固氮溶磷细菌 本研究利用磷酸三钙之液体培养基(subba and Riley，1962)及菌 (10，一10。cfum1—1)后，每隔6小时测定pH、水溶性磷含量(Murphy 定溶磷效应。菌种分泌物之有机酸测定则用HPI，c分析。菌种问亲缘关系则利用随意放大 多型性DNA(RAPD)技术分析(Youn譬and 豆、落花生及玉米)之效应则于盆栽测试之。 结果与讨论 溶磷能力研究结果显示在接种固氮溶磷细菌的液体钙磷培养基中，水溶性磷浓度随时 问与菌数增加而增加，而培养过程中培养基pH值则逐渐下降3～4个单位，其中花生根瘤 mI，～。改变培养基的氮源 菌PNl08培养48小时后培养基的水溶性磷浓度更高达235．6pg 研究结果显示固氮溶磷细菌在以铵态氮及有机态氮为主要氮源时有较大的相对溶磷能力， 而以葡萄糖为主要碳源时，菌株也有较大的相对溶磷能力。 溶磷机制的研究上，以高效能液相层析仪分析固氮溶磷细菌分泌物之有机酸种类与浓 一3】一 度，结果显示各菌种分泌之有机酸种类及浓度皆有所不同，测得的有机酸主要为柠檬酸、酒 石酸及葡萄糖酸，且菌种有机酸之分泌量与溶磷能力问并无直接相关。分别测量接种固氮溶 磷细菌于钙磷及铁磷液体培养基时所产生的有机酸，发现所分泌的有机酸的种类及浓度皆 有差异，显示菌株利用不同无机磷酸化合物之生理代谢途径珞有差异。 ■■11爿_磷。 在固氮溶磷细菌对各种不同种类及浓度抗生索之抗药性研究方面，显示固氮溶磷细菌 可对四环霉素之抗药浓度可达50pgmL～，故于培养基中添加四环霉素可以帮助固氮溶磷 chain 间的亲缘性与群丛关系较为相近，其中分离自美国的不溶大豆根瘤菌UsDAllo与台湾根 瘤菌间的亲源关系有较大的距离，其基因相似度值为o．36一o．55。 在莴苣生物分析结果显示固氨溶磷细菌之培养液有显著促进莴苣胚根生长的功能，显 示圈氮溶磷细菌可以促进植物根系生长。在砂土杯栽试验中，于砂土中种植玉米种子，并分 别接种五株固氮溶磷细菌，在五星期内，玉米根圈之固氮溶磷细菌数随时问增加而逐渐减 少，至第五周时玉米根圈菌数仍可维持在105～107cFug“鲜根，显示固氮溶磷细菌接种至 土壤五周后，仍可存活于玉米根圈。由植体及土壤分析结果显示，本研究之供试固氮溶磷菌 种接种于玉米后，在砂土中种植五周之短期中，对玉米生长效应并无显著影响，但由土壤有 效性磷浓度、植体古磷浓度、台氮浓度、干物重及根干物重之测定结果中，显示接种固氨溶磷