西索米星分批发酵动力学特性.pdfVIP

第 5 卷第 4 期 过 程 工 程 学 报 Vol.5 No.4 2005 年 8 月 The Chinese Journal of Process Engineering Aug. 2005 西索米星分批发酵的动力学特性 1 2 1 1 1 1 陈剑锋 , 张元兴 , 郭养浩 , 孟 春 , 石贤爱 , 陈 凡 (1. 福州大学生物科学与工程学院，福建 福州 350002 ； 2. 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海 200237) 摘 要：伊尼奥小单孢菌 F003 的发酵特性研究表明，西索米星发酵过程具有典型的非生长耦联特征. 当以淀粉为主 要碳源时，对数生长期最大菌体比生长速率为 0.058 h−1，产物合成期最大产物比合成速率 0.0018 g/(g⋅h). HPLC 和酶 法测定结果显示发酵液中主要的可发酵糖为麦芽糖，适合菌体生长的麦芽糖浓度或葡萄糖浓度分别为 10.0~25.0 和 7.5~15.0 g/L，可发酵糖浓度低于 10.2 g/L 将限制西索米星合成. 西索米星发酵过程淀粉水解酶表观活性的动力学特性 表明，在对数生长期淀粉水解酶表观活性较高，最大值为 0.84 g/(L⋅h) ，在发酵中后期淀粉水解酶表观活性仅为最大值 的 1/4~1/20，导致可发酵糖浓度降低，限制西索米星的合成. 西索米星浓度大于 0.50 g/L 将明显抑制产物合成. 关键词：西索米星；动力学特性；淀粉水解酶；产物合成 中图分类号：TQ465.2; Q815 文献标识码：A 文章编号：1009−606X(2005)04−0430−04 1 前 言 inyoensis F003)为本课题组诱变保存菌种[4] ，是低产菌株 经诱变选育后得到的，西索米星组分最多时可占发酵液 西索米星(Sisomicin)是小单孢菌生物合成的一种氨 中抗生素总浓度的90%. 基糖苷类广谱抗生素[1−3] ，不但能直接用于生产西索米 2.2 培养基与培养条件 星针剂，而且是半合成抗生素奈替米星(Netilmicin)的原 斜面、种子、摇瓶和 5 L 罐发酵培养条件以及 30 m3 料. 中国生产的西索米星约占世界产量的 80%. 自1970 工业罐发酵生产条件同参考文献[4]. 年 美 国 Schering 公 司 的 Weinstein 等 报 道 了 2.3 分析方法 Micromonospora inyoensis 能生物合成西索米星后，对该 西索米星浓度(P)测定采用薄层层析生物显影法和 抗生素的研究多集中于菌种选育及其半合成药物奈替 微生物检定法[4] ，检定菌为短小芽孢杆菌(Bacillus 米星的化学合成两方面，在西索米星发酵工艺优化和发 pumilus CMCC 63202). 酵过程控制方面的研究明显滞后[4]. 对西索米星发酵的 菌体浓度(X )测定采用细胞干重法. 动力学研究及其发酵过程的优化，国内外未见报道. 麦芽糖浓度(M) 采用高效液相色谱法(Backman 30 多年来，国内外西索米星生产菌主要有美国 System Gold HPLC)测定，250 mm×4.6 mm C18 色谱柱 Schering 公司的 M . inyoensis 及其诱变菌株、福建省微 (Backman 公司产品) ，流动相为重蒸水，流速 0.8 生物研究所的M . inyoensis var dengjiangensis 和本课题 mL/min ，柱压(16.0±0.1) MPa，柱温(32±0.5)