天麻素对缺血再灌注损伤星形胶质细胞的保护作用和其对一氧化氮合成酶活性的影响.pdfVIP

2001 年 9 月第 24 卷第 5 期 北京中医药大学学报 　　　 　　 September 2001 , Vol. 24 , No. 5 Journal of Beijin g University of TCM ·11 · 天麻素对缺血再灌注损伤星形胶质细胞的保护作用 及其对一氧化氮合成酶活性的影响 ① 胡建军 　洪庆涛 　唐一鹏 　孙承琳 (北京中医药大学中西医结合研究所 　北京 100029) ( ) 摘要 :观察天麻素对脑缺血再灌注损伤星形胶质细胞胶原纤维酸性蛋白 GFA P 表达、乳酸脱氢酶 ( ) ( ) L D H 漏出量以及一氧化氮合成酶 N OS 活性的影响。结果 :天麻素大、小剂量组 GFA P 纤维样 改变减轻, 强阳性反应细胞数减少; L D H 漏出量下降; N OS 活性减弱。提示 :天麻素对模拟脑缺血 再灌注损伤星形胶质细胞有良好的保护作用, 其途径之一可能是通过抑制 N OS 活性的反应性增 强来实现的。 关键词 :天麻素; 细胞培养; 星形胶质细胞; 胶原纤维酸性蛋白; 乳酸脱氢酶; 一氧化氮合成酶 中图分类号:R285. 5 ( ) 　　星形胶质细胞 astrocyte 是脑内数目最多的细 新生 2～3 d Wistar 大鼠大脑皮层 , 025 %胰蛋白酶 胞 ,但长期以来未曾受到足够的重视 ; 近年研究表 消化后 2000 r/ min 离心 5 min ;接种液终止消化 ,反 明 ,星形胶质细胞可表达表面分子并可分泌多种营 复吹打 ,过细胞筛 ,收集细胞悬液 ;调节细胞浓度为 8 - 1 养因子和细胞因子 ;星形胶质细胞与神经元的交互 50 ×10 L ; 04 % 台盼蓝镜检细胞存活率大于 ( ) 99 % ; 25cm2 塑料培养瓶中接种上述细胞悬液 5 作用 ,对于中枢神经系统 CNS 内环境稳态、可塑性 mL ,置于含 94 %空气、6 %CO2 37 ℃恒温培养箱内 , 以及神经信息传递有相当大的影响。在脑缺血再灌 培养 24 h 后 ,全换完全培养液 ; 以后每3 d 更换 1/ 2 ( 注引起的迟发性神经元死亡 delayed neuronal 完全培养液 ,培养至 8 d 或 9 d ,细胞融合度达 80 % death ,DND) 的发生及药物治疗引起的修复过程中 , 左右。 星形胶质细胞本身的变化及其参与的环节与作用 , 转接种 :全换完全培养液 ,正常条件下培养 2 ～ 非常值得重视。本实验选取体外培养的星形胶质细 3 h ,置 37 ℃恒温摇床240 r/ min 振荡 18 h , 倒掉液 胞为研究对