巨噬细胞与苯妥英钠中介的旁分泌机制在心肌梗死后组织修复中的作用.pdfVIP

基础研究 2007海河之滨心脏病学文章汇编 巨噬细胞希濞浮粼中介的旁分l泌杌j胁削叽梗死后鲴眵}修复中的作用 任宁1周欣2舒瑶‘黄体钢‘曾山2姜铁民2李贺2李玉明2 1天津医科大学第二医院天津心脏病研究所心脏科 2中国人民武装警察部队医学院附属医院心血管病研究所心内科 目的。探讨巨噬细胞和PHT介导的旁分泌机制对心肌梗死后组织修复和心室重塑过程的影响 并探讨其可能机制。·建立Wistar大鼠心肌缺血再灌注模型，并在梗死后早期进行PHT预刺 激的腹腔巨噬细胞心肌内移植，观察其对组织病理学、分子生物学和血流动力学的影响， 方法-贴壁法培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞，并以苯妥英钠对部分体外培养的巨噬细胞进行 预刺激(2411)，移植前用荧光染料DAPI标记。建立Wistar大鼠心肌缺血再灌注模型，成活动 只)，单纯巨噬细胞移植组(M①组，20只)，以及苯妥英钠预刺激的巨噬细胞移植组(Mo-PHT 组，16只)。再灌注同时，M①组M中-PHT组向左心室缺血区中心及周边分别以lX105细胞／只， lI 100L的剂量多点注射巨噬细胞和苯妥英钠预刺激的巨噬细胞；AMI组和PHT组注射不完全 lI LG-DMEM培养基(100L)IPHT组从术后即刻开始，连续14天腹腔内注射PHT(75皿gag／天)． 术后第7天和第28天，通过苦味酸一天狼猩红染色测定胶原容积分数(C、，F)、膨展指数、梗死 面积，及反映胶原成熟度的胶原成分比例；抗a—SMA、vwF及WGA荧光染色分别测定梗死区小 blot 动脉密度和毛细血管密度，及非梗死区心肌细胞横截面积(CSA)。术后7天采用Western 分析梗死区血管内皮生长因子(vEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶 蛋白表达水平．术后第28天行有创血流动力学分析。 结果，体外培养的巨噬细胞经苯妥英钠刺激后生长状况稳定；贴壁的细胞绝大多数细胞呈 CD68阳性；贴壁的巨噬细胞被DAPI成功标记。术后1天心肌梗死区组织CD68免疫荧光染 面积显著减小(P0．05)；与AMI组比较，Mo组和Mo_P耵组术后7天和28天非梗死区 死区胶原成熟度显著增加(PO．05)；与M①组比较，M①一PHT组术后第7天和第28天梗 天毛细血管密度有增加趋势；与Mo组比较，M①一PHT组术后第7天和第28天毛细血管密 TI好一l和TIMP-2蛋白表达水平均显著增强(PO．05)。 结论。苯妥英钠可能通过激活巨噬细胞介导旁分泌效应，上调多种与组织修复密切相关的生 长因子／关键酶系的蛋白表达水平，加速组织修复过程，改善心肌梗死后心室重塑和心脏功 能。 关键词l巨噬细胞，苯妥英钠，心肌梗死，组织修复，心室重塑，旁分泌