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基础研究 2007海河之滨心脏病学文章汇编
巨噬细胞希濞浮粼中介的旁分l泌杌j胁削叽梗死后鲴眵}修复中的作用
任宁1周欣2舒瑶‘黄体钢‘曾山2姜铁民2李贺2李玉明2
1天津医科大学第二医院天津心脏病研究所心脏科
2中国人民武装警察部队医学院附属医院心血管病研究所心内科
目的。探讨巨噬细胞和PHT介导的旁分泌机制对心肌梗死后组织修复和心室重塑过程的影响
并探讨其可能机制。·建立Wistar大鼠心肌缺血再灌注模型,并在梗死后早期进行PHT预刺
激的腹腔巨噬细胞心肌内移植,观察其对组织病理学、分子生物学和血流动力学的影响,
方法-贴壁法培养Wistar大鼠腹腔巨噬细胞,并以苯妥英钠对部分体外培养的巨噬细胞进行
预刺激(2411),移植前用荧光染料DAPI标记。建立Wistar大鼠心肌缺血再灌注模型,成活动
只),单纯巨噬细胞移植组(M①组,20只),以及苯妥英钠预刺激的巨噬细胞移植组(Mo-PHT
组,16只)。再灌注同时,M①组M中-PHT组向左心室缺血区中心及周边分别以lX105细胞/只,
lI
100L的剂量多点注射巨噬细胞和苯妥英钠预刺激的巨噬细胞;AMI组和PHT组注射不完全
lI
LG-DMEM培养基(100L)IPHT组从术后即刻开始,连续14天腹腔内注射PHT(75皿gag/天).
术后第7天和第28天,通过苦味酸一天狼猩红染色测定胶原容积分数(C、,F)、膨展指数、梗死
面积,及反映胶原成熟度的胶原成分比例;抗a—SMA、vwF及WGA荧光染色分别测定梗死区小
blot
动脉密度和毛细血管密度,及非梗死区心肌细胞横截面积(CSA)。术后7天采用Western
分析梗死区血管内皮生长因子(vEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、基质金属蛋白酶
蛋白表达水平.术后第28天行有创血流动力学分析。
结果,体外培养的巨噬细胞经苯妥英钠刺激后生长状况稳定;贴壁的细胞绝大多数细胞呈
CD68阳性;贴壁的巨噬细胞被DAPI成功标记。术后1天心肌梗死区组织CD68免疫荧光染
面积显著减小(P0.05);与AMI组比较,Mo组和Mo_P耵组术后7天和28天非梗死区
死区胶原成熟度显著增加(PO.05);与M①组比较,M①一PHT组术后第7天和第28天梗
天毛细血管密度有增加趋势;与Mo组比较,M①一PHT组术后第7天和第28天毛细血管密
TI好一l和TIMP-2蛋白表达水平均显著增强(PO.05)。
结论。苯妥英钠可能通过激活巨噬细胞介导旁分泌效应,上调多种与组织修复密切相关的生
长因子/关键酶系的蛋白表达水平,加速组织修复过程,改善心肌梗死后心室重塑和心脏功
能。
关键词l巨噬细胞,苯妥英钠,心肌梗死,组织修复,心室重塑,旁分泌
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