温州医学院《生物化学》讨论题(大题),题库.docVIP

生物化学讨论题 基因治疗 案例：1990年9月14日，美国国立卫生研究院（National Institute of Health，NIH）的Blease 和Anderson 合作进行了第一例人类基因治疗。患者是一位由于体内缺乏腺苷脱氨酶（adenosine deaminase，ADA）而患有重度联合免疫缺陷症（severe combined immunodeficience，SCID）的4岁女孩。采用梯度分离得到患儿血细胞中的单个核细胞，在含有CD3抗体和IL-2存在情况下培养这些细胞以刺激T淋巴细胞增值，以携带ADA基因和neo基因反转录病毒转染增殖的细胞，数日后将细胞输回体内。该患者在随后的10个半月中，共接受了7次上述的自体细胞输回体内，患者免疫功能明显增强，临床症状改善。用PCR分析表明，患者血液中约有相当于正常人的25％的ADA基因转染细胞。此次治疗结果令人满意，大大推动了临床基因治疗的发展。问题讨论：1、 什么是基因治疗？它的基本程序有哪些？2、 将外源基因导入细胞内的常见方法有哪些？答：基因治疗是现代生物医药领域中的一场革命，是指在基因水平上进行疾病治疗，包括纠正人自身基因的结构或功能上的错乱，阻止病变的进展，杀死病变细胞或抑制外源病原体遗传物质的复制，是遗传病从根本上进行治疗的惟一途径，在恶性肿瘤治疗中发挥了越来越重要的作用，基因治疗发展至今已有600多个基因治疗临床方案中绝大部分是癌症的基因治疗。基因治疗必须解决“有效性、安全性和质量可控性”问题，必须具备有疾病相关基因的克隆技术、疾病相关基因表达载体的重组构建技术以及该基因在体内的高效转移和表达技术等，因此基因治疗有其特殊性和困难性，也曾受到世人广泛关注和激烈争论。基因治疗的基本程序：(一)治疗性基因的获得 (二)基因载体的选择(三)靶细胞的选择(四)基因转移方法(五)转导细胞的选择鉴定(六)回输体内实施基因转移的途径主要有两类：一类是ex vivo,另一类是in vivo。前者是指将含外源基因的载体在体外导入人体自身异体细胞，经体外细胞扩增后，输回人体。后者是将外源基因装配于特定的真核细胞表达载体，直接导入人体内，载体可以是病毒或非病毒型，甚至是裸DNA。第一种方法易于操作，也比较安全；第二种方法有利于大规模工业生产，但是难以保证安全性，技术上要求也高。应按不同疾病和导入基因的不同性质予以选择。