构建遗传图的新方法_单精子PCR分型技术.pdfVIP

遗传 HERED ITA S (Beijing) 20 (2) : 39～42 1998 构建遗传图的新方法 ———单精子 PCR 分型技术① 赵书红 　李 　奎 　彭中镇 盛志廉 (华中农业大学动物分子生物学与育种研究室 , 武汉 430070) 　( 东北农业大学动物科学研究所 , 哈尔滨 150030) Revie w of Single Sperm Typing by PCR Method and Its Appl ication ZHAO Shuhong 　L I Kui 　P EN G Zhongzhen (Lab . of Animal Molecular Biology and Breeding , Huazhong Agricultural University , Wuhan 430070) SHEN G Zhilian ( Institute of Animal Science , Nort heast Agricultural University , Harbin 150030) 以DNA 做为遗传标记使得在任何生物 中进行基因作 图成为可能 。精细遗传 图 ( high resolution genetic ) ( ) map 的构建将使数量性状的定位以及用其进行标记辅助选择 marker - asisted selection , MA S 变为现实 , 从 而对在世界范围内提高食物的产量和质量起到主导作用 。在高等动物中 , 传统的遗传图的构建依赖于家系分 析法 。此法是通过后代体细胞的基因型来推断亲本减数分裂产物 (精子或卵子) 的基因型 。该法有 3 方面的 局限性 : ( 1) 世代间隔长 ; (2) 后代数 目少 ; (3) 多态信息含量 ( PIC) 低 。统计分析表明 , 家系分析一般能 使检测的遗传图距精确到 1cM , 要达到比这更小的遗传图距需检测数 目庞大的后代个体 , 但实际中难以做到 。 ( ) ( ) ( ) 最近发展起来的单精子分型 single sp erm typing 技术 Li 等 , 1988 在高等动物 尤其是单胎动物 基因作 图方面展示了广阔的应用前景 。此技术应用 PCR 法在短期内可将单个精子的 DNA 扩增到足够分析的量 , 而 来自双杂合子父亲的一个精子与这个父亲所产生的一个后代连锁信息量是相等的 , 因此分析双杂合子父亲单 ( ) 个精子中两位点 locus 的基因型就可计算出此两位点间的重组率 。此法可极大地提高样本含量 , 使重组率的 估计精度小至 0 1cM 甚至更小 , 比传统的家系分析法至少要提高 10 倍以上 。本文将对此技术用于构建遗传图 方面的原理 、技术与进展做一综述 。 1 应用单精子 PCR 分型构建遗传图的原理与技术 11 原理 假设一个雄性动物为双杂合子 ( A B / ab) , 且无交换发生 , 对此个体的单个精子进行基因型分析 , 会发现 每个精子的基因型仅为 A B 、ab 两种亲本型中的一种 。如发生交换 , 则还会出现 A b 和 aB 这两种重组型精子 , 其比例取决于两位点的重组率 ,