家猪细胞因子信号传导抑制因子克隆与序列分析.pdfVIP

2010，VOLUME12，NO．1ANlMALBIOTECHNOLOGYBULLETrN 家猪细胞因子信号传导抑制因子的克隆与序列分析 范雯1，何夏萍1，孟风艳1，李芳莲1，刘蓓1，李娟1，聂庆华2， 张细权2。王子淑1王亚军1+ (1．四川大学生命科学学院，成都610064：2．华南农业大学动物科学学院，广州510642) 引言 细胞因子(Cytokine)是一类调节机体免疫和神经内分泌功能的生物活性物质，JAK．STAT Activated TransducerandActivatorof (Janus Kinase—Signal Transcription)通路的激活是细胞 因子发挥其生物效应最普遍且最重要的细胞内信号传导通路之一。其中，细胞因子信号传导 的抑制因子(Suppressorofcytokine and Johnston,2004)。此外，SOCS家族成员还参与对垂体生长激素(growthhormone．OH)和 目前已发现八种SOCS家族成员(CIS， 催乳素(Prolactin)胞内信号传导的负调节。 and SOCS。l—SOCS．7)。该家族成员的蛋白质结构近似(Krebs Hilton，2000)，均由N区(氨 通路的激活而产生，继而抑制细胞因子的信号传导。有关SOCS蛋白家族成员的基冈敲除小 鼠会有异常表现：CIS基因敲除小鼠没有明显的异常表型；SOCS．1基凼敲除后小鼠于出生 and 3周后死亡(Krebs et 增加30％q0％(Metcalfeta1．，2000；Greenhalgha1．，2002)；SOCS．3基因敲除的小鼠胚胎和 and SOCS．3转基因小鼠胚胎均不能存活(KrebsHilton，2000)；此外，SOCS．6基因敲除小鼠 发育和生殖能力正常，但雌雄两性均较野生型小鼠轻约10％，说明存在轻度生长迟滞(Krebs et a1．，2002)。作为重要的经济动物，家猪生长、繁殖、抗病等性状备受关注。SOCS蛋白家 族对家猪生长、繁殖、抗病等性状的影响仍不清楚。本研究拟克隆家猪SOCS．1，SOcS．2， 材料方法 取长白猪的肝脏和脑组织，提取RNA，反转录后以cDNA作为模板，采用特异性引物 的cDNA全长，挑取阳性克隆进行序列测定，同时构建真核表达载体用于体外功能分析。 结果 中。 SOCS．2基因cDNA全长为 其中：SOCS．1基因cDNA全长为832bp(编码220a．a．)； 本研 鉴定做准备。 讨论与结论 and SOCS蛋白是细胞因子、生长激素、催乳素等受体信号传导的重要调节因子(James 有鉴于细胞因子、生长激素、催乳素协作参与动物生长发育、繁殖等生理过程的调控，可以 预计，SOCS蛋白家族对家猪生长发育、繁殖、疾病存在影响。本研究已成功获得 SOCS．1～SOCS．7的基因全长，并已成功构建真核表达载体。这些结果对以后进一步阐明 SOCS蛋白家族在家猪中的生理功能奠定基础。 基金项目：国家转基凶新品种培育重大专项(2009ZX08009．145B) ‘通讯作者：王亚军教授t四)ll大学生命科学院Email：cdwyjhk@gmail．C01