白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶的分离纯化和性质.pdfVIP

动 物 学 研 究 2008，Aug. 29(4) ：399-404 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research doi:10.3724/SP.J.1141.2008.04399 白唇竹叶青蛇毒5′-核苷酸酶的分离纯化及性质 * 陈 夏，余晓东 ，邓 敏，李 卉，林亦心，和七一，柳建平 （重庆师范大学生命科学学院，重庆市生物活性物质工程研究中心，重庆市动物生物学重点实验室，重庆 400047 ） 摘要：用 DEAE-SephadexA-25 、Sephadex-G-100 和 CM-SephadexC-50 三步柱层析分离法，从白唇竹叶青 （Trimeresurus albolabris）蛇毒中分离纯化出具有5′-核苷酸酶活性的组分。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子 量为48.03kDa ，HPLC 柱层析图谱为单一峰。该组分是一个糖蛋白，以一磷酸腺苷（AMP ）为底物时，其酶活力 为330.33 μg Pi/ （min·mg ）；而以二磷酸腺苷（ADP ）为底物时，其酶活力为123.56 μg Pi/ （min·mg ）。金属 离子Zn2+ 、Fe3+和Cu2+对5′-核苷酸酶活性有显著的抑制作用，EDTA 可完全抑制其酶活性。该酶的最适pH 为9， 最适温度为50℃。该组分还具有抑制由ADP 诱导的血小板聚集的生物功能。 关键词：白唇竹叶青蛇毒；5′-核苷酸酶; 分离纯化 中图分类号：Q502 ；Q959.6 文献标识码：A 文章编号：0254-5853-(2008)04-0399-06 Purification and Characterization of 5′-nucleotidase from Trimeresurus albolabris Venom * CHEN Xia, YU Xiao-dong , DENG Min, LI Hui, LIN Yi-xin, HE Qi-yi, LIU Jian-ping (College of Life Science, Chongqing Normal University; Chongqing Engineering Research Center of Bioactive Substance; Chongqing Key Laboratory of Animal Biology, Chongqing 400047) Abstract: A 5′-nucleotidase was isolated and purified from the snake venom of T. albolabris using three steps of chromatography including DEAE-SephadexA-25, Sephadex-G-100 and CM-Sephadex C-50. Using SDSand HPLC column chromatography the purified 5′-nucleotidase proved to be homogenous. It was a glycoprotein with a molecular weight of 48.03kDa. The enzymatic activities of the purified 5′-nucleotidase were 330.33 µg Pi/min mg and 123.56µg Pi/min mg when us