发酵法提取燕麦β葡聚糖初步探索.pdfVIP

发酵法提取燕麦D-葡聚糖的初步探索 潘妍，何聪芬，韩扬，台喜生，王昌涛 (北京工商大学植物资源研究开发北京市重点实验室，北京，100037) 摘 要 研究了发酵法对提取燕麦麸皮中的B一葡聚糖的影响，比较了发酵液中B-葡聚糖的含量。结果显示，4 种酵母菌发酵后发酵液中3-葡聚糖含量都比未经过发酵的燕麦麸培养液中B一葡聚糖含量明显增加。采用酵母 发酵的方法提取燕麦B一葡聚糖的最优发酵条件：发酵培养基在灭菌前加蛋白酶、淀粉酶和糖化酶共同处理，所 用菌种为黄酒酵母，发酵时间控制在48h；摇床参数为170r／min，28。C。 关键词B-葡聚糖，酵母菌，发酵 1．3．2燕麦麸皮培养液发酵 燕麦麸皮中含有丰富的卜3、1-413．葡聚糖¨。]， 而酵母菌细胞壁含有1-3、l-613．葡聚糖一曲1，用酵母将酵母菌菌液接种到发酵培养基中，在28℃， 170 菌发酵燕麦麸培养液，酵母菌大量繁殖的同时生成了 r／min真空摇床发酵48h。然后，对发酵液进行 000 酵母B-葡聚糖；另一方面酵母菌可以利用燕麦麸培 离心，12 r／min，20min，取上清液。用刚果红法 养液中的淀粉、蛋白质等营养成分，使燕麦麸培养液 测定B．葡聚糖的含量¨．s·，用福林．酚法测定蛋白质 中本来含有的B．葡聚糖纯度提高。本文采用发酵的 含量一1，用苯酚．硫酸法测定多糖含量¨…。 方法提纯燕麦B一葡聚糖进行了初步的研究。 2 实验结果 1 材料与方法 2．1 啤酒酵母 1．1 材料 燕麦麸皮，由张家口面粉厂提供；啤酒酵母、酒精 号培养液不加酶处理，3号培养液加入淀粉酶处理，4 酵母、黄酒酵母、酿酒酵母，食品发酵研究所；蛋白酶、 号培养液加入蛋白酶处理，5号培养液加入淀粉酶和 蛋白酶、糖化酶，购于Novozymes公司。 糖化酶共同处理，6号培养液加入蛋白酶、淀粉酶和 1．2仪器与试剂 糖化酶共同处理。在发酵过程中，1号培养液不加入 紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责 啤酒酵母的空白发酵液，2、3、4、5和6号培养基分别 任公司；培养箱，上海一恒科学仪器有限公司；超净 加入啤酒酵母发酵。发酵48h后，测定发酵液中13- 台，苏州苏洁净化设备有限公司。 葡聚糖含量、蛋白质含量和总糖含量。 表1啤酒酵母发酵产物的各项指标 1．3实验方法 1．3．1 配制燕麦麸皮培养液 取料液比为1：20配制燕麦麸皮培养液，然后再 进行酶处理。 h；然后 蛋白酶：调pH值至10—1l，55℃水浴1 加3％一5％蛋白酶；继续55℃水浴3h。 淀粉酶：5％的淀粉酶加酶量为1％，80℃水浴30 mino 从表1可以看出，加入啤酒酵母的燕麦麸皮发酵 糖化酶：加1％的糖化酶，55℃水浴2～3h。 液中B一葡聚糖含量都增加；其中3种酶共同处理的 在接菌发酵之前对燕麦麸皮培养液进行高压灭 燕麦麸皮发酵提取物B．葡聚糖达到了0．655m【g／mL。 菌121℃，20rain。 不加酶处理也不加菌的培养液为空白，与空白比较就 第一作者：在读硕士研究生(王昌涛为通讯作者)。 得到各种加菌培养液的B．葡聚糖提