发酵法生产硬化葡聚糖的研究.pdfVIP

第二届全国发酵工程学术讨论会论文集 1998 康学真 王玉春’ (中国科学院化工冶金研究所生化工程国家重点实验宣。北京100080) ■量 特定采件卞。观寨了生物t增长、多糖合成、剐产物草酸的产生以及发酵过程中发酵渡漉变芈行为的变化规律．实验结果 裹明．生钷量可达到9．169／L．硬化葡橐糖产量达6．62s／L．副产物草馥降至0．229／L 美t订硬化葡幕糖．硬化葡寨糖葺．气升式反应器．草酸 硬化葡聚糖是某些真菌分秘的胞外多糖“1．是一种中性的同聚多糖．其分子结构是由以8·DO，3) 键连接的D．吡晡葡聚糖基为主链．主链上每兰个葡糖基再以p-D(I，6)键连接一个m毗哺葡聚耱基侧链组 成啪．它具有优趣的增稠性、假塑性和稳定性，耐高温、高盐．对pH适应性广，微生物难降解等优点，因 此可广泛应用子石油、油漆、陶瓷、医药、化妆品、农业、食品等20多个工业领域o““．尤其是在医药 上，硬化葡聚糖与其它多糖相比。具有更显著的免疫促进性、抗肿瘤和病毒的肫力，是一种有效的生物 反应效应荆(BRM)【．1．同其它多糖诸如香菇多耱，茯苓多糖、裂桐菌多糖等进行比较，硬化葡聚糖的 抗肿瘤效果是最好的“。． 搅拌式反应器中对其进行了一些研究．传统的机械搅拌通气罐虽然在搅拌、混台等方面存在一些优点． 但也存在一些限制性因素。如投资大、结构复杂、耗能大、放大难(很少见容积超过400-500ms的)、 维修困难等． 因此开发高效节能的新型反应嚣用于发酵生产是必要的．通过气动搅拌的气升式反应器 用于微生物发酵比传统的机械搅拌罐有许多优点：结构简单、节省投资、易于密封及泊毒、操作维修方 便、噪音小等．由于它有规则的循环流动以及匀称的动量传递性质以及较低的剪切力作用，它对细胞的 损害极微．正是因为气升式反应器具有这些优点，在生产SCP、丝状真菌、废水处理中己获得广泛应 用．王玉春和B．McNeil等在外环流气升式反应嚣中对硬化葡聚糖发酵进行了研究”1．本文主要采用内 环流气升式反应器。对发酵过程中生物量、多糖、副产物草酸以及发酵液的流变学行为的变化规律进行 了观察和研究． 1材料和方法 1．1曹株及培养基 of 菌株：硬化葡聚糖苞(Sclerotium 3006(USDepartment glueanicum)NRRL Illinois)· 2P04·7H20I．0； 培养基：固体培养基：土豆葡萄糖培养基．液体发酵培养基(g几)：蔗糖30．0：KH +通讯联系人 一216— 康学真等： 发酵法生产硬化葡聚糖研究 O．Ol：pH用0．1N的HCI调至4．5 MgS04．7H200．5；(NH．)2S0．I．0；酵母膏：1．O；FeS04 4．5，121℃蒸汽灭菌 121℃蒸汽灭菌30min．液体种子培养基：液体发酵培养基添加0．Sg／LKCI，pH 15min． 1．2发酵装置及工艺条件 反应器：本实验所用内环流气升反应器总体积为8升．工作体积为5．6升·如图1所示· 培养条件：在培养7天后的固体平板培养物上加入10ml无 菌培养液，轻刮表面，制成菌液．将此茵液转移入装有 200ml培养基的500ml三角瓶中，摇床培养2天。温度28℃， 转速175rpm。作为生物反应器发酵的种液．反应器内装入 5．4升发酵培养基。接入200m1种液，培养温度为28℃，pH 用lNNaOH流加控制在4．5。通气量为1．4vvcn 1．3分析方法 菌体浓度：过滤称干重法．多糖测定：酒精沉淀法：取 5ml滤液．加入10ml无水乙醇进行多糖沉淀。将沉淀澹出， 干燥。称重．蔗糖测定：苯酚一浓硫酸比色法．草酸分析： 分光光度计测定法o“．铵离子测定：靛定酚蓝比色法…1·