6-O-羧甲基壳聚糖对人增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β_1表达的影响.pdfVIP

240 中国美容医学2011年 2月第 2O卷第 2期 ChineseJournalofAestheticMedicine．Feb．2011．Vol，20．No．2 ·论著 · 6--0--羧甲基壳聚糖对人增生性瘢痕成纤维细胞 TGF-I3表达的影响 吴 丹 ，匡瑞霞 ，王志国 ，陈 璐 ，周 明 ，黄洪杰 1．青岛大学医学院 山东青岛 266021；2．青岛大学医学院附属医院整形美容中心 山东青岛 266013 [摘要]目的：观察不同浓度 6-0-羧 甲基壳聚糖 6-0一CMC 对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞 hypertrophicscarfibrob 1asts，HSFBs 转化生长因子一D】 transforminggrowthfactor～beta1，TGF—p1 蛋白及mRNA表达的影响，在分子水平上 探讨其抑制增生性瘢痕生长的作用机制。 方法：体外培养人HSFBs，选取第 3～5代细胞进行下一步实验。实验分组采用含不 同浓度 6-O-CMC 0，1O0，200，400~g／m1 的DMEM培养液分别进行培养。培养24h后，显微镜下观察各组HSFBs形态及生长情况。 收集细胞培养上清，运用双抗体夹心ELISA法检测各组 TGF-p蛋白表达水平。运用荧光定量RT—PCR技术检测各组TGF-p mRNA表达水平。 结果：与空白组相比，三个药物剂量组 HSFBsTGF-p 蛋白及mRNA的表达均减少 P O．05 ，药物浓度越高表 达量越低 P O．05 ，且TGF-p蛋白及mRNA表达的变化具有一致性。 结论：6-O-CMC有抑制体外培养的人HSFBsTGF一口表 达的作用，初步探讨了6-O-CMC发挥抑制增生性瘢痕生长的作用机制，为羧 甲基壳聚糖类药物的开发利用提供理论依据。 [关键词]6-0-羧甲基壳聚糖；增生性瘢痕成纤维细胞；TGF-p；ELISA；荧光定量RT-PCR [中图分类号]R619．6 [文献标识码]A [文章编号]1008—6455 2011 02—0240-03 Effectsof6-O-carboxymethyl-chitosanontheexpressionofTGF-p1inhumanhypertrophic scarfibroblasts wuDan’，KUANGRui—xia2,WANGZhi—guo2,CHENLu2,ZHOUMing1tHUANGHong—jie’ 1．MedicalCollegeofQingdaoUniversity，Qingdao266021，Shandong，China；2．DepartmentofPlasticSurgery，The AffiliatedHospitalofMedicalCollegeQingdaoUniversity，Qingdao266013，Shandong，China Abstract：Objective Toobservetheeffectsof6一O—carboxymethyl—chitosan 6一O—CMC1withdifferentconcentrations ontheexpressionoftransforminggrowthfactor—beta1 TGF—p1 inhumanhypertrophicscarfibroblasts HSFBs invitro． M ethods HSFBswere cultured invitro，andthe 3～5 generation cellswere chose to the nextexperimentTheDMEM mediumwithdifferentconcentrationsof6一O—CMC 100，200，400ug／m1 wereusedintheexperimentalgroups，andthe controIgroupwithout6一O—CMC．After24hours．cellmorphologyandgrowthstateofHSFBswereobservedunderthe microscope．TheexpressionofTGF一131proteinwasdetectedbyELlSA TheexpressionofTGF一311mRNAwaswas detectedbyReal—timeRT—PCR ResultsComparedwiththecontrolgroup，theexpressionsofHSFBsTGF-311protein andmRNAintheothergroupsalIreducedobviously fP 0．O5 Concentrationandexpressionwerei