禽流感病毒H9N2亚型xizhang分离株HA与NA基因的克隆与序列分析.pdfVIP

628蟋》2010年学术年会 T040108 禽流感病毒H9N2亚型西藏分离株HA和NA基因的克隆与序列分析 索朗斯珠1’2 邹威1王灿1孙小美1金梅林1陈焕春1 (1．华中农业大学农业微生物国家重点实验室动物病毒室，湖北武汉430070： 2．西藏农牧学院动物科学技术学院高原动物疫病研究室。西藏林芝860000) 引言／目的 为了从分子水平上掌握西藏各地区H9亚型禽流感病毒的遗传进化情况，以及它与国内外H9亚型禽 流感病毒的变异情况和流行规律之间的关系。 材料方法 本研究汇集了2009年不同时间从西藏部分地市养殖场分离的3株禽流感H9N2亚型毒株，采用 RT-PCR技术对其HA和NA基因进行扩增、克隆和测序，并对所得序列进行同源性和遗传进化分析。 结果 本试验分离到的3株病毒之间的HA和NA基因变异程度不大，同源性达到98％以上，在遗传进化中 毒株可能与Bj／94由同一毒株进化而来。由于基因突变使Tb／1毒株的HA基因在313位出现了一个新的糖 基化位点，TbN毒株的NA基因缺失了146位的糖基化位点：唾液酸吸附位点上有明显的突变；HA的裂 解位点附近和NA基因的受体结合位点区域内都有氨基酸突变。 讨论 禽流感病毒H9N2亚型西藏分离毒株与国内不同地域分离的流感病毒H9N2亚型毒株遗传进化并没 有表现出一定的地域性，与地理位置相距较近的甘肃、宁夏等地方分离毒株同源性较低，而与地理位置 相距较远的山东、浙江等地方分离毒株同源性较高。病毒是通过候鸟还是运输发生传播是值得研究的一 个方面，明确病毒的传播途径和方式对西藏地区禽流感病的控制和预防具有重要意义。 HA基因的潜在糖基化位点，会影响AIV结合宿主细胞类型和结合水平，所以是影响AIV毒力的重要 因素之一。3株西藏分离毒株具有较多的糖基化位点，Tb／2和nI／4均的HA基因有8个糖基化位点，而 Tb／1HA基因则有9个糖基化位点，在第313个氨基酸位点上多了一个糖基化位点，在国内为首次报道； Tb／1和Tb／2的NA基因均有6个糖基化位点，而删A基因有5个糖基化位点，与国内外代表毒株比较只 有Tb／4在第146个氨基酸位点上缺失了糖基化位点；这些糖基化位点的改变是否与病毒在西藏高海拔、 缺氧环境中为适应宿主而发生改变，将有待于我们进一步研究。 参考文献(略) ·论文发表在：畜牧兽医学报．2010VoL41(12)：1659．1666．