新型结核粘膜基因疫苗chitosan—pECANS的制备与免疫效果.pdfVIP

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2015-08-03 发布于安徽
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新型结核粘膜基因疫苗chitosan—pECANS的制备与免疫效果.pdf

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新型结核粘膜基因疫苗chitosan—pECANS 的制备及免疫效果岳艳徐薇高海峰熊思东 (复旦大学免疫生物学研究所，上海医学院免疫学系，上海，200032) 背景：新型结核疫苗的研制极为迫切。前期研究以结核抗原HSP65作为载体，建了新型结核疫苗一pECANS，并证实经肌注免疫能够有效诱生结核特异性全身免疫应答。目的：根据结核杆菌通过呼吸道粘膜感染的特点，综合pECANS疫苗诱生T细胞免疫的优势，在已建立的粘膜递送系统chitosan—DNA的基础上，构建新型结核粘膜基因疫苗chitosan—pECANS，旨在诱生全身及肺粘膜局部结核特异性免疫应答。复合物，并以50 gDNA剂量于0、2、4、6周滴鼻免疫BALB／c小鼠，末次免疫后2周检测特异性粘膜免疫和全身性免疫应答。结果：4次免疫后 12000，同期支气管灌洗液中也可检测到较高水平的结核特异性SIgA，效价3200， ELISPOT检测提示chitosan—pECANS可诱生较强的特异性抗体应答。以IFN一_y ^y水平达2425pg／ml，高于pECANS组的1780pg／ml。以FACS分析脾和肺淋巴细 1 1’细胞分别占1．78％细胞分别占脾、肺CD43细胞的0．96％和1．22％，CD8+IFN一3t 和1．19％，显著高于其他组。结核特异性杀伤显示，效靶比为50：1时， chitosan—ECANS滴鼻免疫可有效诱生结核特异性全身及肺粘膜局部体液及细胞免疫，其诱导的细胞免疫和IFN分泌效果优于pECANS基因免疫。【关键词】：结核；粘膜基因疫苗；chitosan—DNA；IFN；SISA 56