籽鹅产蛋前后卵巢组织差异表达基因的筛选与验证.pdfVIP

31l 抗病遗传育种与繁殖技术专题 o T020047 籽鹅产蛋前后卵巢组织差异表达基因的筛选和验证 王建发1 郭景茹1 计 红2康 波3张旭2柳巨雄1杨焕民2 163319； (1．吉林大学农学部畜牧兽医学院，吉林长春130062；2．黑龙江八一农垦大学动物科技学院，黑龙江大庆 3．四川农业大学动物科技学院，四川雅安625014) 引言／目的 卵巢是雌性鹅的币要生殖器官，赴多种牛殖激素作用的靶器官，鹅产蛋前后卵巢组织中某些基因是 否表达(或者表达量的差异)均可能汽接或问接影响鹅的产蛋性能。冈此，探讨产蚩前期和产蛋期鹅卵 巢组织基W表达的差异对于阐明鹅产蛋的分+f调控机理将具有匿要的意义，并H．通过对这些差异表达基 因进一步的功能研究，还可为提高鹅产蛋性能的研究提供新的途径。 材料方法 本研究以5月龄和8月龄籽鹅卵巢组织作为研究对象，利J叶J抑制消减杂交技术构建了产蛋前期和产蛋 期籽鹅卵巢组织消减cDNA文库，采用反向斑点杂交技术对该文库进行了差异农达毖闪的筛选和锰定， 同时利．}}j实时定酸PCR技术检测了部分芹异表达基1人l住产蛋期和产蛋前期卵巢组织巾表达醚的变化，对 ESTI进行cDNA末端快速扩增，获得垠W全长，并进ir生物信息学分析。 结果 97个为真阳性克隆并进行测序，获得26个在产蛋期籽鹅卵巢组织中高效农达的ESTs。利用实时定晕PCR 技术对筛选获得的ESTs表达量进行了检测，8个未知基囚在产蟹期籽鹅卵巢组织中的相对表达量分别比 cDNA序列，与北京鸭I：1．烯醇化酶基因mRNA全长CDS序列同源性高达97％。 讨论 产蛋数量是一个复杂性状，对于复杂性状这个“黑箱”的解析需要运用多种生物学手段，目前研究 人员倾向于采用系统生物学的方法去进行研究。本研究从转录组学的角度入手利用抑制性消减杂交技术 筛选获得了产蛋前期和产蛋期籽鹅卵巢组织差异表达基因，为进一步深入挖掘和利用优异种质资源，阐 明鹅产蛋的分子调控机理奠定了基础。 参考文献 HM，ZhouILl，ela1．Differential ofovarianin and 【l】KangB，Yang expressionprofiling genesprelayinglayinggeese【J】- Science，2009，88：1975-1983． Poultry 【2】康波，姜冬梅，郭景茹，等．籽鹅卵巢组纵差异表达基【大1的研究，畜牧兽医学报，2010，41(6)：657·663． 131f丹，郭景茹，刘胜军，等．籽鹅卵巢产蛋性能相关基【大I全长cDNA序列的克隆与分析，中闺生物制晶学杂志，2010， 23(12)：1320．1324． (2)：275．278．