补肾法、疏肝法对促性腺激素预处理小鼠卵巢PTX-3影响的比较.pdfVIP

世界中医药学会联合会妇科专业委员会第四届中医妇科国际学术大会论文集 补肾法、疏肝法对促性腺激素预处理小鼠卵巢PTX．3 影响的比较 段彦苍，杜惠兰 河北医科大学中西医结合学院，石家庄050091 中医学认为，肾藏精，主生殖，肾所藏先天之精包括生殖之精，故肾为先天之本；而肝藏血， 司血海，主疏泄，即肝为血脏，是女性生殖调节的枢纽，血海蓄溢受肝所司，叶天士在《临证指南 医案》中提出“女子以肝为先天”，即肾、肝与女子生殖功能密切相关。临床上运用补肾法、疏肝法 治疗不孕症、月经不调等排卵障碍性疾病疗效显著。研究前期通过对补肾法、疏肝法促进卵巢排卵 数目比较研究发现，使用高剂量补肾调经方促进卵泡发育并诱发排卵和灌服逍遥丸高剂量促进卵泡 发育、低剂量诱发排卵实验显示可增加促性腺激素预处理小鼠排卵数目，而排卵数目的增多可能是 促进了卵泡发育或(和)诱发了排卵。在排卵过程中，卵丘卵母细胞复合物(COC)的膨胀对卵母 细胞成功的排卵至关重要，细胞外基质(ECM是)COC膨胀的基础，透明质酸是ECM的主要成分 之一，与透明质酸(HA)结合的典型蛋白有正五聚蛋白(Pentraxin3，PTX3)，这种蛋白为形成稳 因此。PTX3是影响排卵的关键因素之一。第一部分实验证实补肾法II高+III高组、疏肝法逍高+逍 低组可以使排卵数目增加，但其作用机理是否与调节PTX3基因表达有关值得我们深入研究。本研 究观察了补肾法和疏肝法对PTX3 mRNA表达的影响，以探讨两种治法对排卵过程中细胞外基质重 要蛋白的影响。 1材料与方法 1．1动物 雌性昆明种未成年小鼠96只，体重16～189，清洁级，购自河北实验动物中心(合格证号：2008 l～1003)。 1．2药物 中药购自石家庄乐仁堂，补肾调经II号方主要包括女贞子、熟地黄、山茱萸、枸杞子、当归、 白芍、山药、紫河车等。补肾调经III号方主要包括紫石英、仙茅、淫羊藿、熟地黄、菟丝子、覆盆 子、肉苁蓉、丹参、枳壳、当归等。均采用传统煎煮方法，补肾调经II号方高剂量含生药1．059／mi； 补肾调经III号方高剂量含生药1．439／ml，密封分装，4C保存。逍遥丸(河南省宛西制药股份有限公 司生产，批号090513)用蒸馏水溶解，高剂量组混悬液含生药0．1 1794nL，低剂量组含生药0．0599／mi， mareserum 4C保存。注射用血促性素(pregnant chorionic 恩药业有限公司生产：注射用绒促性素(human chain reaction， 集团丽珠制药厂生产。反转录聚合酶链式反应(reversetranscription-polymerase RT-PcR)相关试剂由北京赛百盛基因技术有限公司生产：引物由生工生物工程(上海)有限公司合 成。 1．3仪器 世界中医药学会联合会妇科专业委员会第四届中医妇科国际学术大会论文集 电子天平(德国SARTORIUS Thermal MicorCL 100)，电 21R)，凝胶成像系统(美国GelLogic Cycler)；低温离心机(美国Thermo，IEC 泳仪(美国Bio。Rad公司)。 1．4动物分组及给药方法 将小鼠适应性喂养1天后，根据体重将小鼠区组随机分为4组，正常组、对照组(PMSG+HCG)、 补肾组(II高+III高)、疏肝组(逍高+逍高)，每组24只。 实验第1、2、3天，补肾组、疏肝组小鼠分别灌服补肾调经II号方高剂量、逍遥丸高剂量促进 卵泡发育，对照组、正常