血红铆钉菇真菌对油松苗木的抗旱作用机理的研究.pdfVIP

血红铆钉菇真菌对油松苗木的抗旱作用 机理研究 吕小红 曲爱军 (山西省林业科学研究院)(山东农业大学) 关键词：血红铆钉菇、油松、作用机理 摘 要：本研究表明：血红铆钉菇能有效的促进油松苗木在干早条件下的生长，主要是由于 它能降低叶绿素a／b的比值，利于植物抗早性；能有效的减少膜值过氧化过程，减少干旱逆境对油 松苗术细胞膜的伤害：能有效产生抗氧化酶，防止干旱逆境对植物的伤害。 油松系山西省主要造林树种，但由于干旱冈子的影响(山西省年降雨量400—650毫米，但分布 不均)，造成油松在荒山造林中油松苗木成活率低，严重影响造林绿化成果。许多研究表明，菌根 真菌能有效促进寄主苗术的生长，但由于植物根际微环境的变化，导致了这种促进作用的表现很不 稳定。探索干旱冈子对这种“促进作用”的影响，而开展试验研究，对-J：解决山曲省油松抗旱造林 绿化将产生积极作．}}j。 1．1．试验材料 试验菌种：血红铆钉菇岔删fj』晒(Schaeff．：Fr．)Land．et Nannf。菌种来源：山西省林科 院。试验所用树种：油松。 1．2．试验方法 1．2．1．1叫体凶剂的制备和十壤处理： 将培养基质加入PACH培养液搅拌，湿度达70％为宜，再装入罐头瓶2／3处，在】21℃下灭菌1h， 冷却后将生长旺盛的不同平板菌种接入瓶中，并设一个不接种的处理，朋丁．对j{《：i苗小的处理。最后 均放入在25℃略室中培养20—25d备用。 育苗基质为林F士与培养基质混合，按1：l(v／V)进行高温高压灭菌1h备心。 1．2．2．接种方法 首先，把灭菌的滤纸片放入营养钵堵住底层的渗水孔，在底层覆jt一层厚3cm，lilif体菌剂接种 相当丁4．5mg菌丝干重的菌种，在接种后表面覆士2cm，撒卜2粒已经发芽的油松种f，由】二油松 是喜光，浅种的树种，所以，上层覆十lcm。 1．2．3．干旱处理 发芽后35d，中断浇水，每天早晚测定两次十壤含水鼙，当士壤含水量达剑20％时，在实验室 内测定油松苗小有关生理各项指标。 1．2．4．对油松幼曲相关生理生化指标的测定 1．2．4．1．菌根侵染率和苗高的测定 接种后每大甲．晨9：00浇水一次，每次每钵浇水40ml，发芽后30d测定侵染率和茧高。 】．2．4．2．nI+绿素含苗的测定： 取新鲜的针叶，擦净表面，剪碎(去掉中脉)，混匀。称取剪碎的新鲜样品0．29，共3份，分别 放在研钵中，加入少量的石英砂及2—3m1的95％的乙醇，研成匀浆，再加乙醇lOml，继续研磨至组 织变白。过滤后定容剑25ml，把叶绿体色素提取液倒入光径lcm的比色杯内。以95％乙醇为空白， 在波长665nm、649nm和470nm下测定吸光度。 Ca=13．95×A665—6．88×A649 Cb=24．96×A649—7．32×A665 Cx．e=(1000×A470一2．05xCa一114．8×Cb)／245 n|．绿素色素的含量： (色素的浓度×提取液体积×稀释倍数)／样品鲜重(mg／g．咖 1．2．4．3游离脯氮酸含量的测定 游离脯氨酸含量采用比色法测定。首先塞试管，编号。分别向各试管准确加入脯氨酸标准液(每 u O．8、2：4、3．2、4．oml，再用蒸馏水将体积补至4．oIIll，24、32、40g的脯氨酸标准系列。再向各 试管加入冰醋酸在沸水中加热显色30min，取出后冷却至室温，向各试管以萃取红色产物。萃取完 后，避光静置4h以上。等待完全用分光光度计在520nm波长下测定消光值，以脯氨酸含量绘制标准 曲线。其次，将采回的针叶新鲜样品，将游离脯氨酸的提取。样品放入具塞的试管中，加入5m1的 3％磺基入沸水浴中提取15min，过滤，滤液待测。最后测定，准浓度的脯氨酸系列溶液同法显色测 定。结果计算测定结果按下式计算： 脯氦酸(％)=C×V／(10=’×W×a)． 式中C：从标准曲线上查的脯氨酸的微克数； V：提取液的总体积ml；W：样品干重(u