13-甲基十四烷酸诱导膀胱癌细胞株T24凋亡的机制研究.pdfVIP

· 1266· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysi~ !堑(!)； 二 1 [文章编号】 1000-4718(2009)07—1266—05 13一甲基十四烷酸诱导膀胱癌细胞株 T24凋亡的机制研究木 尹心宝， 林天歆， 许可慰， 黄 海， 江 春 ， 韩金利， 黄 健 (中山大学附属第二医院泌尿外科，广东 广州510120) [摘 要] 目的：研究 l3一甲基十四烷酸诱导膀胱癌T24细胞凋亡的作用，探讨其可能的机制。方法：将不 同浓度的13一甲基十四烷酸作用于膀胱癌T24细胞 ，用MTr法检测细胞增殖，流式细胞仪 (FCM)检测细胞周期 ， TUNEL法检测细胞凋亡指数，蛋白免疫印迹法分析参与凋亡的蛋白。结果：药物处理2h后p38、JNK磷酸化增强， AKT磷酸化减弱，8h后线粒体中细胞色素c释放 ，FADD及磷酸化 FADD没有明显变化，caspase酶底物 PARP、 laminB、RB在 12h出现明显的裂解片段，且药物诱导 I24细胞凋亡的过程有时间浓度依赖效应。结论：在 13一 MTD诱导I24细胞凋亡的过程中p38MAPK和JNK／SAPK信号通路被激活，PI3K／AKT信号通路被抑制，进而激活 线粒体凋亡途径，使线粒体内的细胞色素c释放到胞浆，激活caspase酶，裂解相应的凋亡底物 laminB、Rb、PARP， 促进 T24细胞凋亡。 [关键词] 膀胱肿瘤；13一甲基十四烷酸；细胞凋亡；信号转导 [中图分类号] R737．14 [文献标识码] A M echanism Of13一methyltetradecanoicacid in inducingbladdercancer T24cellapoptosisin vitro YINXin—bao，LIN Tian—xin，XUKe—wei，HUANGHai，JIANGChun，HANJin—li， HUANGJian (DepartmentofUrology，TheSecondAffiliatedHospitalofSunYat—senUniversity，Gnangzhou510120，China．E—mail： 加@yahoo．com．ca) [ABSTRACT] AIM ：Tostudytheeffectof13一methyhetradecanoicacid(13一MTD)onbladdercancerT24celt apoptosisandtheunderlyingmechanisms．METHODS：T24cellsweretreatedwith13一MTD atdifferentconcentrations． MTrcellproliferationassaywasusedtoobservetheinhibitoryeffect．Thecellcycleandcellapoptosisweredisplayedby FCM．ApoptosisindexwasinvestigatedbyTUNELassay．Western blottingwasusedtodetecttheexpressionofapoptosis relatedproteins．RESULTS：p38andJNKphosphorylationwerepresented2hafterstimulatedby13一MTD，butAKT phosphorylationwereinhibited．CytochromeCwasreleasedfrom theintermembranespaceofmitochondria8hlater．No changeofFADDandP—FADDwasobserved．Severaldownstreamcaspasesubstrates(PARP，laminB，RB)werecleaved in12h．CONCLUSION：InthecourseofT24cellapoptosisinducedby13一MTD．JNK／SAPKandp38MAPK signa