FAK基因沉默增强白血病细胞对化疗药物敏感性.pdfVIP

主圄痘堡生理盘壹 se alofPathophysiology2011，27(7)：1315—1318 · 1315 · [文章编号] 1000—4718(2011)07—1315—04 FAK基因沉默增强白血病细胞对化疗药物敏感性 许 吕宏 一 方建培 ， 王 英 ， 翁文骏 (中山大学孙逸仙纪念医院 JL~-I-，检验科 ，广东 广州 510120) [摘 要] 目的：本实验研究黏着斑激酶(focaladhesionkinase，FAK)基因沉默对白血病细胞化疗药物敏感 性的影响。方法：构建FAKshRNA慢病毒载体，转染至BCR／ABL—BaF3白血病细胞株 ，通过蛋白质印迹方法检测 FAK蛋白表达情况。体外应用不同浓度的化疗药物伊马替尼处理BCR／ABL—BaF3细胞，予AnnexinV标记检测细 胞凋亡情况。建立 白血病动物模型，联合应用FAKshRNA及伊马替尼进行处理，观察小鼠生存情况，分析白血病细 胞在小鼠骨髓及脾脏的分布情况。结果：成功建立FAKshRNA慢病毒载体，该载体能有效沉默FAK基因表达。体 外实验发现5p~mol／L伊马替尼处理时，空白对照组与FAK基因沉默组中AnnexinV阳性细胞百分比分别为 (9．76 ±1．97)％和 (21．90±3．20)％，差异显著(P0．05)；予50p,mol／L伊马替尼处理时，2组中AnnexinV阳性细胞百 分比分别为(56．10±6．00)％和(82．10±5．70)％，差异显著(P0．05)。白血病动物实验中，与空白对照组相比， 生存分析结果显示FAK基因沉默组小鼠的生存时间明显延长。白血病细胞输注后第60d，与空白对照组相 比，白 血病细胞在FAK基因沉默组小鼠骨髓和脾脏的分布明显减少。结论：FAK基因沉默能明显增强白血病细胞对化 疗药物敏感性，提示 FAK基因沉默有望成为白血病治疗的新策略。 [关键词] 黏着斑激酶；基因沉默；白血病 ；药物敏感性 [中图分类号】 R331．1 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．07．012 FAK genesilencingenhanceschemotherapeuticdrug sensitivity in leuke- miccells XULti—hong，FANGJian—pei，WANGYing，WENGWen—jun (DepartmentofPediatrics，DepartmentofClinicalLaboratory，SunYat—senMemorialHospital，SunYat—senUniversity， Guangzhou510120，China．E—mail：luhong．xu@yahoo．com) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectoffocaladhesionkinase(FAK)genesilencingonchemotherapeuuc drugsensitivityinleukemiccells．METHODS：Lentiviral—FAK—shRNA wastransfectedintoBCR／ABL—BaF3leuke． miccelis．TheproteinexpressionofFAKwasdetectedbyWestern blotting．BCR／ABL—BaF3leukemiccellsweretreated withdifferentconcentrationsofimatinibinvitro，andtheapoptosiswasdeterminedbylabelingwithAnnexinV．A murine modelofleukemiawas estbalishedandthemiceweretreatedwithFAK shRNA andimatinib．Survivaltimeanddistribution ofleukemiccellsinbonemalTO