p38MAPK基因敲除对亚砷酸盐诱导细胞凋亡的影响.pdfVIP

维普资讯 · 892 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(5)：8 =墨95 【文章编号] 1000—4718(2008)05—0892—04 p38MAPK基因敲除对亚砷酸盐诱导 细胞凋亡的影响木 刘爱华。， 龚小卫 ， 魏 洁 ， 明小燕 ， 王达安 ， 邓 鹏 ， 罗深秋 ， 姜 勇 (南方医科大学’南方医院呼吸科 ，病理生理学教研室和广东省蛋白质组学重点实验室， 细胞生物学教研室，广东 广州 510515) [摘 要] 目的：研究p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在应激刺激诱导的细胞凋亡 中的作用。方法： p38 和p38 一细胞用 NaAsO 刺激后 ，用多聚甲醛固定及DAPI染核，利用荧光显微镜观察细胞核的形态改变。 NaAsO 刺激的p38 和p38 一细胞用AnnexinV—FITC与Pl双标后，用流式细胞分析仪分析细胞凋亡百分率。 结果：NaAsO：刺激后 ，大部分p38 一细胞产生典型的凋亡细胞形态学变化 ，p38 细胞仅少数细胞出现核固缩。 而且，p38I／一细胞中凋亡细胞百分率较刺激前和p38 细胞都显著增加，而p38 细胞的凋亡率没有明显变化。 结论 ：p38基因敲除使细胞对亚砷酸盐应激刺激的耐受性下降，容易发生凋亡；p38丝裂原活化蛋白激酶可能在提 高细胞的应激适应能力上发挥着重要的作用。 [关键词] p38MAP激酶；基因敲除；细胞凋亡；应激；亚砷酸盐类 [中图分类号] Q25 [文献标识码] A Effectsofp3SMAPK geneknockoutonarsenite——inducedcellapoptosis UUAi—hua ，GONG Xiao—wel。，WEIJie ，MING Xiao—yan ，WANG DA —an ， DENG Peng2 LUOShen—qiu ，JIANGYong2 ， (DepartmentofRespiratoryDiseases，NanfangHospital，DepartmentofPathophysiology，KeyLaboratoryofProteomicsof GuangdongProvince，DepartmentofCellBiology，SouthernMedicalUniverstiy，Guangzhou510515，China．E—mail： yji~ng@fimmu．corn) [AeS~,Acr] AIM_,Toinvestigatetheroleofp38mitogen—activatedproteinkinase(MAPK)inthecellapopto- sisinducedbyarsenite．METHODS：Afterthetreatmentwithorwihtoutarsenite，p38 andp38 一cellswerefixed wiht paraformaldehydeandstainedwithDAPI．Thenuclearmorphologicalchangeswereobservedunderafluorescencemi- croscope．p38 na dp38一，一cellsweredouble—stainedwithAnnexinV —FITCna dPI．nadhteratiosofapoptoticcels weredetectedbyflowcytometry．RESULTS：Wiht thestimulationofarsenite，typical apoptoticmoprhological chnagesap- pearedinmostp38一一cells，yetonlyafewp38 cellsshowednucleuscondensation．Consist