siRNA沉默LBH基因促进人支气管上皮细胞周期进展.pdfVIP

ChineseJournalof 2011，27(2)：357—360 · 357 · [文章编号】 1000—4718(2011)02—0357—04 siRNA沉默L．BH基因促进人支气管上皮细胞周期进展牢 刘启才 ， 王颖峰 ， 杨春祥 ， 李晓艳 ， 彭 燕 ， 彭 杰 ， 李 冰 ， 李 立 (广州医学院实验医学研究中心，广东 广州510182；。荆门市第二人民医院神经内科，湖北 ~Jf-J448000； ’中山大学附属第一医院肾内科，华南肿瘤学国家重点实验室 ，中山大学肿瘤防治中心影像介入科，广东 广州510060) [摘 要] 目的：利用合成的小分子干扰RNA(siRNA)转染人支气管上皮细胞 16HBE，观察 日(1imb—bud andheart)基因表达下调对 16HBE细胞周期及相关基因表达的影响。方法：脂质体2000转染靶向LBH基因的 siRNA到 16HBE细胞，荧光定量 RT—PCR检测 siRNA转染后LBH基因表达，流式细胞术检测 LBH基因沉默后 16HBE细胞周期的改变，荧光定量RT—PCR及Westernblotting检测LBH基因沉默后细胞周期素 E1和E2表达水 平。结果：50nmo]／LsiRNA转染 16HBE细胞48h后，LBH基因的表达水平只有对照组的 14％；siRNA转染 16HBE细胞48h，其 G。期细胞百分率比对照组减少9．28％，而 s期细胞百分比增加 l4．08％；16HBE细胞在 5O nmol／LsiRNA的转染后，细胞周期素E2的表达水平为对照组的2倍 ，而细胞周期素El的表达没有发生明显改变。 结论：靶向于LBH基因的siRNA能有效沉默 16HBE细胞中LBH基因的表达，LBH基因的表达下调促进了16HBE 细胞周期 G ／S期的进展；细胞周期素E2的表达上调参与了LBH沉默导致的细胞周期G ／S期的进展。 [关键词】 RNA干扰；基因，LBH；16HBE细胞；细胞周期 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．02—027 RNAi—-mediatedknocking—-down ofLBH genepromotescellcyclepro- gressin16HBE cells LIUQi—cal一，WANGYing—feng，YANGChun—xiang，LIXiao—yah，PENGYan， PENGJie 。LIBing，‘LILi (ExperimentMedicalResearchCenter，GuangzhouMedcialCollege，Guangzhou510182，China；DepartmentofNeurolo— gY，TheSecondHospitalofJingmenCity，Jingmen448000，China；DepartmentofNephrology，TheFirstAffiliatedHospi— tal，StateKeyLaboratoryofOncologyinSouthernChina，lmagingDaignosisandInterventionalCenter，CancerCenter， SunYat—senUniversity，Guangzhou510060，China．E—mail：liuqicai968@yahoo．corn．cn；li2@ma il．sysu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectofsmallinterferingRNA(siRNA)onlimb—budandheart(衄曰) geneexpressionin16HBEceHs，nadfurthertoobservethechangeof16HBEcellcycleafterknockingdownofLBHgene． METHODS：Synthetical siRNA targetingLBH genewastransfected into 16HBE cellsbythemethod oflipofec