不同浓度胰岛素对人肾小管上皮细胞SREBP-1、FAS表达及脂质形成的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(7)：1275—1279 · 1275 · 【文章编号] 1000—4718(2010)07—1275—05 不同浓度胰岛素对人 肾小管上皮细胞 SREBP一1、 FAS表达及脂质形成的影响术 郝 军， 刘青娟， 郑书深， 刘淑霞， 赵 松 ， 王 辉 ， 吴海江， 段惠军 (河北医科大学病理学教研室，河北 石家庄050017) 【摘 要] 目的：探讨不同浓度胰岛素对人肾小管上皮细胞(HKC)固醇调节元件结合蛋白一1(SREBP一1) 和脂肪酸合成酶(FAS)表达 以及细胞 内脂滴形成的影响。方法：分别给予 0nmol／L、1nmolfL、10nmol／L、100 nmol／L和200nmolfL胰岛素刺激HKC细胞6h。RT—PCR技术检测 SREBP一1和 FASmRNA表达，免疫细胞化 学和Westernblotting检测SREBP一1蛋白的表达，油红 O染色检测细胞内脂滴。结果：与0nmol／L胰岛素组相比， 10nmol／L、100nmoL／L和200nmol／L组 HKC细胞SREBP一1和FASmRNA表达均升高，其中100nmol／L组升高最 明显。免疫细胞化学技术显示 SREBP一1蛋白定位于HKC细胞的胞浆，在 10nmol／L、100nmol／L和200nmol／L组 HKC细胞其表达明显增强。Westernblotting检测显示 10nmol／L、100nmol／L和200nmolfL组HKC细胞SREBP一1 蛋白的前体和成熟片段表达增强，其中100nmol／L组表达最强，差异显著。油红O染色显示胰岛素刺激6h后只 有 100nmol／L胰岛素组 HKC细胞内可见明显红染脂滴颗粒。结论：高浓度胰岛素引起 HKC细胞 SREBP一1和 FAS表达上调并最终导致细胞内脂滴沉积，这可能是代谢综合征引起肾脏脂质沉积的重要机制之一。 [关键词] 胰岛素；肾小管上皮细胞；固醇调节元件结合蛋白质 1；脂肪酸合成酶；脂滴形成 [中图分类号】 R589 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2010．07．006 Concentration—dependenteffectofinsulin on expressionofSREBP 一1． FASandlipiddropletformationinHKC cells HAOJun，LIUQing—juan，ZHENGShu—shen，LIUShu—xia，ZHAOSong，WANG Hui，WUHai—jiang，DUANHui—jun (DepartmentofPathology，HebeiMedicalUniversity，Shjiiazhuang050017，China．E—mail：duanhj@hebmu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectofinsulinatdifferentconcentrationsontheexpressionofsterolregu— latoryelementbindingprotein一1(SREBP—I)，fatacidsynthage(FAS)andlipiddropletformationinhumanrenalprox· imaltubularepithelialcellline(HKC)．METHODS：HKCcellsweretreatedwithinsulinatconcentrationsof0nmolfL， 1nmol／L，10nmol／L，100 nmol／L and200nmol／Lrespectivelyfor6h．TheanalysisofSREBP一1andFASmRNA was perfomr edbyRT～PCRandtheproteinlevelofSREBP一1wasdetectedbyW estern blottingandimmunocytochemistry．Oil redO stain