STAT3介导了血小板源性生长因子BB诱导的大鼠血管平滑肌细胞Pim-1表达.pdfVIP

· 804 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2013，29(5)：804-809 [文章编号] 1000-4718(2013)05—0804—06 STAT3介导了血小板源性生长因子 BB诱导的 大鼠血管平滑肌细胞 Pim-1表达术 孙晓东 ， 王 燕 ， 王汉琴 ，，弘， 黄铁柱 (湖北医药学院 基础医学研究所 ，附属太和医院生命科学研究所，。人体解剖学教研室，湖北 十堰 442000) [摘 要] 目的：观察血小板源性生长因子BB(PDGFBB)是否可以诱导大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)表达 Pim—I及Pim．1对 VSMCs增殖的影响，探讨STAT3信号分子在这一过程 中的作用 ，为血管重建性疾病 (VRD)的研 究提供实验依据。方法：不同浓度PDGF．BB作用不同时间刺激体外培养的VSMCs，用细胞计数法检测增殖 ；用re- a1．timeRT．PCR检测Pim．1mRNA表达水平 ；Westernblotting检测 STAT3的活性变化 ；用放线菌素 D(actinomycin D)、AG490(JAK特异性抑制剂)及 siRNA沉默 m—和STAT3进行干预。结果 ：PDGF—BB(20 g／L)作用 VSMCs 24h，可以诱导细胞增殖 ，m—沉默抑制了这一过程；正常未经处理的VSMCsPim-1mRNA表达量较低 ，不同浓度 PDGF．BB(10 g／L一50 g／L)作用VSMCs1h，Pim一1mRNA表达明显增加 ，其中以20 g／L最显著；用 PDGF-BB (20 s／L)作用VSMCs不同时间(0．5h一4h)，可显著上调Pim-1mRNA表达 ，以0．5h最显著。用actinomycinD 及AG490预处理后Pim．1mRNA表达随之降低。PDGF．BB可激活 VSMCs中磷酸化 STAT3水平 ，AG490和转染 STAT3一siRNA可抑制 STAT3的磷酸化以及相应的Pim一1mRNA表达。结论：PDGFB·B可通过Pim一1调节VSMCs 增殖；STAT3可能参与了PDGF-BB诱导的VSMCsPim-1表达。 [关键词] Pim．1蛋白；STAT3转录因子；血管平滑肌细胞；RNA干扰；血小板源性生长因子BB [中图分类号] Q78 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2013．05．006 STAT3 mediatesPDGF．BB．induced Pim．1 expression in rat vascular smoothmusclecelIs SUN Xiao—dong 。WANG Yan ，WANG Han．qin ’一 。HUANG Tie．zhu (InstituteofBasicMedicalSciences，InstituteofLfieSciences，TaiheHospital，DepartmentofHumanAnatomy，HubeiU- niversityofMedciine，Shb~n442000，China．E—mail：hanqinwangl11@yahoo．corn．ca) [ABSTRACT] AIM：TostudytheexpressionofPim一1invascularsmoothmusclecells(VSMCs)inducedby platelet·derivedgrowthfactorBB (PDGF-BB)．METHODS：VSMCsisolatedfromratsweretreatedwithdifferentconcen． trationsofPDGF—BBfordifferenttime．TheproliferationofVSMCswasdetectedbycellcounting．ThemRNA expressionof Pim一1was measuredbyreal-timeRT-PCR．TheSTAT3activitywasdeterminedbyWesternblotting．Actinomyc