丹酚酸B抑制氧化应激引起骨髓间质干细胞凋亡的研究.pdfVIP

史垦痘堡生理盘查 ne J0um ofPathophysiology 2011，27(3)：475—480 · 475 · [文章编号] 1000—4718(2011)03—0475—06 丹酚酸 B抑制氧化应激引起骨髓间 质干细胞凋亡的研究 卢碧燕。， 童秀珍 ， 邓宇斌 ， 吴洪福 ，侯景义 (中山大学 中‘山医学院病理生理教研室 ，附属第一医院血液科，广东 广州510080) [摘 要】 目的：观察丹酚酸 B(salB)对氧化应激介导骨髓间质干细胞(BMSCs)凋亡的影响并探讨其作用 机制。方法：大鼠BMSCs培养鉴定后分为5组：空 白对照组、氧化应激组、低浓度salB+HO 组、中浓度 SalB+ H：Oz组和高浓度salB+H2O：组。应用MrH、流式细胞仪(FCM)及 Hoechst标记的方法检测 SalB对氧化应激介导 的细胞活性下降以及凋亡效应的影响；通过DCF荧光染色的方法检测过氧化氢及salB对细胞内活性氧生成的影响； 用Westernblctting的方法检测P—ERK1／2表达情况。结果：NITY结果显示不同浓度的SalB共处理BMSCs24h能 够提高氧化应激情况下的细胞活性，其 中中浓度组的作用更为明显。Hoechst标记 以及 FCM检测 的结果表明： 10{~mol／LSalB处理能够提高细胞活性，减少凋亡数。正常组细胞的DCF阳性细胞率为28．7％ ±8．1％，经 5000anol／LH2O2刺激24h后，阳性细胞数急剧上升，高达86．9％±12．4％。而 10p~mol／LSalB处理组的上升不明 显，仅有42．1％±10．8％。由此可见 ，saIB处理可以减少细胞内活性氧的生成 ；细胞在氧化应激的条件下 P— ERK1／2在15min内开始上调，持续 120min。而这种上调经10~ ol／LSalB处理可以有效降低，同时salB可以 降低细胞基础的P—ERK1／2表达。结论：SalB增强 BMSCs抗氧化应激能力从而减少 HO：刺激引起的细胞凋 亡，其保护机制可能与参与调节凋亡相关信号通路 MEK／ERK1／2和抑制细胞内活性氧生成有关。 [关键词] 丹酚酸B；骨髓间质干细胞；氧化性应激；活性氧簇；细胞外信号调节激酶 1／2 [中图分类号] R363 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．03．011 Salvianolicacid B reducesapoptosisofbonemarrow stem cellsinduced byhydrogenperoxide LUBi—yan ，TONGXiu—zhen ，DENGYu—bin ，WUHong—fu ，HOUJing—yi (DepartmentofPat~#ysiology，ZhongshanSchoolofMedicine，DepartmentofHematology，TheFirstAffiliatedHospital， SunYat一靶nUniversity，Guangzhou510080，China．E—mail：aeng~ @mail．sysu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：ToinvestigatetheeffectofsalvianolicacidB(SalB)onapoptosisofratbonemesenehymal stemceils(BMSCs)inducedbyhydrogenperoxide(H202)．METHODS：BMSCswereincubatedwihtSalBathtecon- centrationof1，10or100p~moL／LwhiletreatedwihtlethalconcentrationofH2O2(500~mol／L)．TheeffectofSalBat differentconcenrtationsontheviabilityofBMSCswasdetectedbyMTY．Howc~ometryw