结缔组织生长因子在高糖诱导的足细胞上皮间充质转化中的作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 chineseJ叫malofPaLh0physi0logy2011，27(12)：2291—2295 · 2291 · [文章编号】 1000—4718(2011)12—2291—05 结缔组织生长因子在高糖诱导的 足细胞上皮间充质转化 中的作用 戴厚永 ， 汤 日宁 ， 郑 敏 ， 倪 杰 ， 马坤岭 ， 刘必成 (东南大学附属中大医院肾内科，江苏南京210009；南通大学附属医院肾内科，江苏 南通 226001) [摘 要] 目的：研究结缔组织生长因子(CTGF)在高糖诱导的足细胞上皮间充质转化(EMT)中的作用。方 法：将在分化条件下的足细胞分为正常葡萄糖(5mmol／L)培养组、正常葡萄糖 +CTGF(50 s／L)组、高糖(30 mmol／L)培养组和高糖+CTGF组 ，在37℃条件下刺激24h。用相差显微镜观察足细胞形态 ，分别用real—timeRT — PCR和Westernblotting方法检测足细胞相关 EMT指标。同时用抗 CTGF抗体和高糖共同培养足细胞 ，检测其对 足细胞 EMT的影响。结果：高糖培养时，足细胞表型发生改变 ，由正常情况下的树枝状变为鹅卵石状，CTGF与高 糖共同培养，进一步使足细胞发生梭形改变。高糖作用下，足细胞发生EMT，上皮细胞标志物 nephrin表达减少，间 充质细胞标志物desmin表达增加 ，CTGF和高糖协同作用 ，使足细胞EMT更加明显，而抗CTGF抗体能抑制高糖诱 导的足细胞EMT。结论 ：CTGF参与了高糖诱导的足细胞EMT的发生过程，阻断CTGF能减轻此病理变化而发挥 足细胞保护作用。 [关键词] 结缔组织生长因子；高糖 ；足细胞；上皮间充质转化 [中图分类号】 R363 [文献标识码】 A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．12．010 Roleofconnectivetissuegrowthfactorinhighglucose——inducedepithelial - - mesenchymal transition inpodocytes DAIHou—yong ，TA‘NGRi—ning，ZHENGMin ，NIJie，MAKun—ling，LIUBi— cheng (InstituteofNephrology，ZhongdaHospital，SoutheastUniversity，Nartjing21ooo9，China；DepartmentofNephrology， Af~iutedHospitalofNantongUniversity，Nantong226001，China．E—mail：liubc64@yahoo．eom．cn) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetheroleofconnectivetissuegrowthfactor(CTGF)inhighglucose—induced epithelial—mesenehymaltransition(EMT)inpedoeytes．METHODS：Thedifferentiatedpodoeytesculturedunderdiffer- entconditionsfor24hat37℃weredividedinto4groups：control(5mmol／Lglucosesolution)，5mmol／Lglucosesolu- tionsupplementedwith50 g／LCTGF，hihg sheose(30mmol／Lglucosesolution)andhihg glucosesupplementedwith CTGF(50 g／L)．Themorphologyofculturedpodocyteswasobservedunderphase—contrastmicroscope．Tostudythe relevantmarkersofEMT，htemRNA andproteinexpressionwasanalyzedbyreal—timeRT—PCR