慢病毒载体介导HIF-1α基因修饰骨髓间质干细胞促进脑缺血大鼠的神经功能恢复.pdfVIP

· 256 · 虫国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(2)：256—261 [文章编号】 1000—4718(2010)02—0256—06 慢病毒载体介导 HIF一10基【因修饰骨髓间质干细胞 促进脑缺血大 鼠的神经功能恢复 叶伟标 一， 邓宇斌 ， 叶美红 ， 蔡 拓 (中山大学中山医学院病理生理学教研室 ，广东 广州 510080；东莞市人民医院，广东 东莞 511700) [摘 要] 目的：探讨静脉注射低氧诱导因子(HIF—loL)修饰的骨髓间质干细胞对脑缺血大 鼠神经功能恢 复的影响及其可能的作用机制。方法：利用慢病毒载体介导 HIF一1 基因修饰骨髓间质干细胞，获得稳定转染 HIF一1ot的骨髓问质干细胞 ，于缺血后3h经股静脉进行体 内移植。在细胞移植后的1、7、14、28d进行神经功能检 查，使用Trc染色观察缺血体积，分别通过TUNEL和pax6、DCX抗体免疫荧光双标分析缺血侧脑组织的神经细胞 凋亡及 内源性神经干细胞增殖、存活情况。结果：脑缺血 BMSCs—mHIF一1ot治疗组在 14d和28d大 鼠神经功能 评分显著低于缺血组 (P0．05)，神经功能得到明显改善；脑缺血BMSCs—mHIF一1oL治疗组脑梗死灶体积小于缺 血组；脑缺血BMSCs—mHIF一1OL治疗组缺血侧脑组织的神经细胞凋亡在 14d和 28d明显少于缺血组 (P 0．05)；细胞移植后7d，脑缺血BMSCs—mHIF一1ot治疗组在海马区域观察到pax6／DCX细胞数量明显多于缺血组 (P0．05)。结论：静脉注射HIF一1 修饰骨髓间质干细胞能够促进脑缺血大 鼠神经功能恢复；抗凋亡及激活并 促进内源性神经干细胞迁移至缺血区可能是静脉注射HIF一1of修饰骨髓间质干细胞治疗脑缺血的机制。 [关键词] 骨髓间质干细胞 ；脑缺血；缺氧诱导因子一1；细胞凋亡 [中图分类号] R329．28 [文献标识码] A ConstitutiveexpressionofHIF—loLinBM SCsreducesneuronalapoptosis andpromotesneuronalproliferationafterstrokeinrats YEW ei—biao，．DENG Yu—bin ，YEMei—hong ，CAITuo (DepartmentofPathophysiology，ZhongshanSchoolofMedicine，SunYat—senUniversity，Guangzhou510080，China； DongguanPeoplesHospital，Dongguan511700，China．E—mail：dengyub@mail．sysu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM ：ToexploredthepotentialroleofHIF一1otinreducingtheneuronalapoptosisandpromoting theneuronalproliferationafterstrokeinrats．METHODS：Thebonemarrow—derivedmesenchymalstemcells(BMSCs) werelentivirallytransducedtoexpressthestablef0m ofHIF一1Ot．Ischemicstrokewasinducedbypermanentmiddleeere— bralarteryocclusion(MCAO)inSprague—Dawleyrats．Neurologicalfunctionwasevaluatedbymodifiedneurologicalse— verityscore(mNSS)．CerebralinfarctvolumewasmeasuredbyTICstaining．Immunohistochemistryandterminaldeoxynu— cleotidyltransferasemediateddUTPnickendlabeling(TUNEL)methodwereperformedt