慢性酒精摄入所致的肝细胞上皮一间充质转化参与小鼠肝纤维化形成.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(1)：77-84 · 77 · [文章编号] 1000-4718(2014)O1-0077—08 慢性酒精摄入所致的肝细胞上皮 一间充质转化 参与小鼠肝纤维化形成 孙玉生 ， 林 波 ， 王思谦’一， 刘 悦 ， 张优敬 ， 郑乃芮一， 皇甫超中 (河南大学 护理学院，医学院环境医学研究所，河南 开封 475004) [摘 要] 目的：探讨慢性酒精摄入对肝组织病理学改变的影响及上皮 一间充质转化对肝纤维化形成的作 用。方法：将30只雄性 C57BL／6小鼠随机分为3组：对照组灌胃给予与酒精组等体积的蒸馏水，低剂量和高剂量 酒精组分别灌胃给予2．0g·kg～ ·d 和4．0g·kg～ ·d 酒精5个月。肝组织病理学改变和纤维化分别用 HE 和 Masson三染色观察；荧光标记的TUNEL法检测肝组织细胞凋亡；自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶 (ALT)和天冬氨酸氨基转移酶 (AST)的活性；肝组织成纤维细胞特异性蛋白1(FSP-1)、et一平滑肌肌动蛋 白(et- SMA)和E．钙黏素表达采用免疫荧光观察；E．钙黏素、et．SMA、FSP-1、转化生长 因子 13(TGF-B。)和缺氧诱导因子 la(HIF．1et)蛋白表达水平用Westernblotting检测。结果 ：与对照组相 比，小 鼠酒精灌 胃5个月后，血清ALT和 AST活性升高；肝组织细胞凋亡增加；低剂量酒精组呈现肝脂肪变性和轻度的肝纤维化，高剂量酒精组呈现出严重 的肝纤维化；肝组织丙二醛(MDA)含量升高，超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)下降；肝细胞 E-钙黏素 表达下降，et．SMA表达增加 ；低剂量酒精组肝细胞内白蛋白和FSP-1共定位 ，而高剂量酒精组肝细胞内只表达FSP一 1；Westernblotting检测结果显示 ，E-钙黏素表达下降，而et-SMA、FSP-1、TGF-B1和 HIF-la蛋 白表达水平升高，但是 HIF．1et蛋白表达水平在高、低酒精组之间无差别。结论：慢性酒精摄人可诱导肝纤维化 ，部分成纤维细胞来源于 肝细胞上皮一间充质转化，其机制可能与肝细胞氧化状态、TGF—B及 HIF—let升高有关。 [关键词] 酒精性肝纤维化；上皮 一间充质转化；成纤维细胞特异性蛋白1；转化生长因子 B，；缺氧诱导因 子 1 [中图分类号】 R363 [文献标志码】 A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2014．01．013 Chronicalcoholintake-inducedepithelial·mesenchymal transition contri- butestohepaticfibrogenesisinmice SUNYu．sheng ，LINBo，WANGSi．qian ，LIUYue，ZHANGYou-jing，ZHENG Nai．rui ．HUANG．FU Chao．shen (NursingCollege，InstituteofEnvironmentalMedicine，MedicalCollege，ttenanUnive~ity，Kaf／eng475004，China．E— mail：chaoshen6403@henu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toevaluatetheeffectofchronicalcoholintakeonthehistopatholoca1changesoftheliver andtodeterminehtecontributionofepithelial-mesenchymaltransition(EMT)tohepaticfibrogenesis．METHODS：Thirty maleC57BIM6micewererandomlydividedinto3groupsasfollowing：themiceincontrolgroupwasgiven(ig)water；the miceinlowdosea