碱性成纤维细胞生长因子对人脑动静脉畸形血管平滑肌细胞增殖和表达骨桥蛋白的影响.pdfVIP

维普资讯 · 382· 生垦痘理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2008，24(2)：382—383、387 [文章编号] 1000—4718(2008)02—0382—03 碱性成纤维细胞生长因子对人脑动静脉畸形血管 平滑肌细胞增殖和表达骨桥蛋 白的影响 曾 涛 ， 陈衔城。^， 秦智勇。， 张 义。， 宫 晔。 (复旦大学华山医院神经外科，上海200040； 福建医科大学附属协和医院神经外科，福建 福州 350001) [摘 要] 目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对体外培养的人脑动静脉畸形(CAVM)血管平滑肌 细胞 (VSMC)增殖和表达骨桥蛋白的影响。方法：应用胶原酶消化法培养人 CAVM 的VSMC，M1Tr法检测 VSMC 的增殖，免疫印迹法检测VSMC骨桥蛋白的表达。结果：bFGF作用于VSMC后 ，细胞增殖活性明显增加。实验组 骨桥蛋白的表达显著高于对照组 (P0．05)。结论：体外条件下，bFGF可以刺激CAVM的VSMC增殖 ，并能促进 其表达骨桥蛋 白。 [关键词] 脑动静脉畸形；肌，平滑，血管；成纤维细胞生长因子2；骨桥蛋白 [KEYWORDS] Cerebralartefiovenousmalformations；Muscle，smooth，vascular；Fibroblastgrowthfactor2；Os— teopontin [中图分类号] R363 [文献标识码] A 脑动静脉 畸形 (cerebral arteriovenousmalfomrations， 组织剪成 0．2cm×0．2cm×0．2cm大小，加入 2OmL0．1％ CAVM)是颅内最常见的血管畸形，常 由一团相互缠绕的、管 胶原酶消化液，37℃水浴45min，加入DMEM培养液，吹打混 径大小各不相同的异常血管组成。CAVM为来源于先天性发 悬，经 100 目的钢网过滤 ，沉淀细胞，加入 DMEM培养液反复 育异常，出生后畸形血管在异常的血流动力学作用下发生不 吹打，悬液加入预制的底部铺被胶原的细胞培养平皿中，置 同程度的血管重塑。立体定向放射外科和血管内介入栓塞 于37℃、5％CO：的培养箱 (湿度为 100％)中培养，42 h后 治疗是 目前CAVM 的主要治疗手段，治疗后的血管病理变化 换新鲜培养液 ，以后每3d换2／3量的培养液，待细胞融合几 的实质也是进行性血管管壁和管腔的重塑而使畸形血管闭 乎成片时传代。收集细胞分别进行透射电镜检查，以CD34、 塞的过程。血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecell， d—SMA单抗进行免疫组化鉴定。 VSMC)的增殖、迁移和细胞外基质的分泌等生物学行为在血 3 bFGF对VSMC增殖的影响 采用 M1Tr法进行 ，取对数生长期的VSMC，实验组培养 管重塑中发挥重要作用，对其生物学行为的调控 已成为相关 疾病治疗研究 的重要方 向…。骨桥蛋 白(osteopontin，OPN) 液中加入20mg／L的bFGF，对照组加入同等体积的生理盐水。 以约2×10cells／L的细胞密度接种至96孔板上，各设6个复 是一种具有多种重要生物学功能的糖磷酸化蛋白，是血管重 孔，同时设只加培养液、不含细胞的空白组用于调零。每42 h 塑过程 中的重要 细胞因子 J。先前 的研 究表明，OPN在 测定 1组的吸光值(A)，取平均值，绘制细胞生长曲线。 CAVM放射及栓塞治疗后的血管病理变化中均有表达，并可 4 bFGF对VSMC表达 OPN的影响 实验分组同上。培 能发挥重要的作用 。本实验拟研究碱性成纤维细胞生长