运用亚细胞蛋白质组学方法发现胃腺癌潜在标志物UCHL1.pdfVIP

· 2358· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2010，26(12)：2358—2362 [文章编号] 1000—4718(2010)12—2358—05 运用亚细胞蛋 白质组学方法发现 胃腺癌潜 在标志物 UCHL1 徐 振 ， 徐松辉 ， 晏光荣 (暨南大学生命与健康工程研究院，广东 广州 510632) [摘 要] 目的：通过对 胃腺癌细胞系SGC7901和永生化 胃正常上皮细胞系GES胞浆组分蛋 白进行差异蛋 白质组学分析，为胃腺癌诊断提供候选生物标志物，进而为阐明胃腺癌发病机理提供新的线索和思路。方法：运用 亚细胞蛋白组份分离结合双向凝胶电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI—TOF—MS)技术筛选鉴 定出SGC7901和GES细胞系胞浆蛋白组分间的差异蛋 白质，并且利用免疫印迹和半定量 RT—PCR方法对得到的 差异蛋白进行验证。结果：筛选得到 l0个差异蛋白，进一步证实，差异蛋白泛素羧基末端水解酶一L】(UCHL1)在 蛋 白质和mRNA水平上，在 胃癌细胞系SGC7901、AGS、BGC823和MKN45中的表达水平均低丁 胃正常上皮细胞系 GES；其在 胃癌组织中的表达水平也远远低于癌旁正常胃组织中的水平。结论：UCHL1蛋白质分子具有作为胃腺 癌诊断检测标志物的潜在应用价值，为开发胃腺癌诊断标志物提供了新的候选蛋白。 [关键词] 胃肿瘤；蛋白质组；泛素羧基末端水解酶Ll [中图分类号] R735．2 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2010．12．014 Identification OfUCHL1asapotentialbiomarkerforhumangastricade· nocarcinomabysubcellularproteom ics XUZhen，XU Song—hui，YAN Guang—rong (InstitutesofLifeandHealthEngineering，JinanUniversity，Guangzhou510632，China．E—mail：tgryan@jnu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Tosearchthebiomarkerforillustratingthepathogenesisofhumangastricadenocarcinomaby differentialproteomeanalysisofthecytosolofhumangastricadenocarcinomacelllineSGC7901andthecorrespondingim· mortalizednormalgastric gland cellline GES．METHODS：The differentialexpression ofcytosolprotein between SGC7901andGEScellswasidentifiedwithsubcellularprotein separationandtwo——dimensional SDS——PAGE combined withMALDI—TOF—MS．Thedifferentialproteinswereconfimr edbyWestern blottingandsemi—quantityRT—PCR．RE- SULTS：Tenrepeatabledifferentialproteinswereidentified．Comparedwiththeexpressionlevelinnomr algastriccellline GES，ubiquitincarboxyl—temrinalhydrolaseL1(UCHLI)wasobviouslydown—regulatedonebothatproteinandmRNA levelSingastricadenocarcinomacelllinesofSGC7901，AGS，BGC823andMKN45．Theexp