胃癌多药耐药细胞株BGC823／5-FU的建立及其耐药机制的研究.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2QQ篷，24( )： 二 !!Q · 2167 · [文章编号] 1000-4718(2008)11—2167—04 胃癌多药耐药细胞株 BGC823／5一FU的 建立及其耐药机制的研究 杨皎娃 ，牛建花 ， 曾季平 ， 刘 永 ， 贾继辉 ， 陈春燕 (山东大学齐鲁医院血液科 ，山东 济南 250012；山东大学医学院 生物化学研究所 ，微生物学教研室，山东 济南250012) [摘 要] 目的：建立5一氟尿嘧啶(5一FU)诱导的胃癌多药耐药细胞株BGC823／5一Fu，探讨凋亡相关蛋白 Survivin、Bcl一2、Bax及 caspase一3与其耐药性产生的关系。方法：采用反复短期暴露并逐渐增加5一FU浓度的方 法建立胃癌耐药细胞株 BGC823／5一FU，MTr法检测此耐药细胞株对5一Fu的耐药倍数及其对临床常用化疗药物 阿霉素、丝裂霉素和顺铂的交叉耐药性，流式细胞术检测细胞P一糖蛋白的表达和柔红霉素积累量；Westernblotting 法检测耐药胃癌细胞株BGC823／5一FU与其亲代药物敏感 胃癌细胞株 BGC823凋亡相关蛋白Survivin、Bcl一2、Bax 及 caspase一3的表达。结果：成功诱导出胃癌多药耐药细胞株BGC823／5一FU，较其亲代细胞BGC823对5一Fu、阿 霉素、丝裂霉素和顺铂的耐药性分别提高 l0．82、2．50、22．23和 2．00倍。其 P一糖蛋白表达较 BGC823细胞增高 (P0．01)，柔红霉素积累量较 BGC823细胞减低 (P0．01)。与亲代药物敏感 BGC823细胞相比，耐药细胞株 BGC823／5一FU细胞Survivin表达上升(P0．05)，Bcl一2表达升高 (P0．05)，Bax表达下降(P0．05)，caspase一3 表达减低 (P0．05)。结论：胃癌细胞株 BGC823在 5一FU的诱导下可形成多药耐药细胞株 BGC823／5一FU， P一糖蛋白、凋亡相关蛋白Survivin、Bcl一2、Bax及 caspase一3可能参与其耐药性的形成。 [关键词] 胃肿瘤；氟尿嘧啶；抗药性，多药 ；细胞凋亡 [中图分类号] R73 [文献标识码] A Establishmentof gastric cancerous multi-—drug resisatnce cellsatin BGC823／5一FU anditsresistancemechanism YANGJiao—wa ，NIUJian—hua ，ZENGJi—ping ，LIU Yong ，JIAJi—hui，CHEN Chun—van (DepartmentofHematology，QiluHospitalofShandong 【 ，Jinan250012，China；DepartmentofBiochemistry， DepartmentofMicrobiology，ShandongUnive~itySchoolofMedciine，Jinan250012China．E—mail：chency@sdu．edu． cn) 『ABSTRACTI AIM ：ToestablishthegastriccancerousmuhidrugresistancecellstainBGC823／5一FUandinves— tigatetherelationshipbetweentheresistanceand theexpressionofapoptosisrelated proteinSurvivin，Bcl一2，Baxand caspase一3．METHODS：HumangastriccancercelllineBGC823wasinducedintoMDR celllinebyintermittentadmin— istrationofhighdoseof5一FU．MTrassaywasusedto