人胰腺癌PANC-1细胞裸鼠移植瘤模型建立及其用于观察载siRNA纳米微粒体内效应的研究.pdfVIP

· 572 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(3)：572-576 [文章编号] 1000-4718(2014)03-0572—05 人胰腺癌 PANC-1细胞裸鼠移植瘤模型建立及其 用于观察载 siRNA纳米微粒体 内效应的研究冰 曾林涓，李景果， 张秋波，钱辰琛， 林 忠， 陈茵婷 ，黄开红 (中山大学附属第五医院肿瘤内科，广东 珠海 519000) [摘 要] 目的：探讨建立人胰腺癌PANC-1裸鼠移植瘤模型的最佳实验方法，并应用该模型进行载基因纳 米微粒体内效应的研究。方法：将不同数量PANC-I细胞悬液接种于BALB／e(nu／na)小鼠右侧背部皮下，当肿瘤 体积达 100mm 时尾静脉注射siRNA 纳米复合物进行活体荧光成像。此外 ，于尾静脉注射负载 siRNA~纳米 复合物，蛋白印迹及免疫组织化学染色法观察肿瘤组织 Kras蛋白表达水平。结果：1×10cells／300 接种成瘤 率达 100％，成瘤时间2周。荧光呈像及组织学检查显示载 siRNA纳米微粒可靶向聚集在肿瘤组织发挥体内基 因沉默效应。结论：本研究报道的人胰腺癌裸鼠移植瘤模型建立方法成瘤率达100％，成瘤时间短，是研究药物示 踪和观察疗效的理想模型。 [关键词] 胰腺肿瘤；模型，动物；纳米微粒；RNA干扰 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000．4718．2014．03．034 Establishmentofhuman pancreatic tumorxenograftmousemodelfor evaluating tumor-homing and gene-silencing effects of siRNA-loading nanoDarucles ZENGLin-juan，LIJing-guo，ZHANGQiu-bo，QIANChen-chen，UNZhong，CHENYin— ting，HUANG Kai．hong (DepartmentofOncology，TheFifthAffiliatedHospitalofSunYat—senUniveniq，Zhuhai519000，China．E—mail：chenyt58 @mail．sysu．edu．cn；huangkh@ma il．sysu．edu．cn) [ABSTRACT] AIM：Toestablishalleffectiveandrapidmethodtodeveloptransplnatedsubcutaneouspancreatic carcinomabyinducingPANC一1cellsintonudemice，andthenusethismousemodeltoevaluatethetumor-homingand gene—silencingeffectsofsiRNA·loadingnnaopartielesinvivo．METHODS：DifferentnumbersofPANC一1ceilsin100 L or300 LPBSwereinoculatedsubcutnaeouslyintothefightflankofBALB／c(nu／nu)mice．Whenthetumorvolume reached100mm ．siRNA nnaopartieleswereinjectedthroughthemousetailveintoperforminvivoimagingassay．Be． sides，themicewerernadomlydividedinto3treatmentgroupstreatedwiht PBS，scrambledcontrolRNAnanoparticlesand siKrasnanoparticles．respectively．TheproteinexpressionofKraswasdetectedbyWesternblottingnadimmunohistochemi— calstaining