溶血磷脂酸对上皮细胞整合素β6表达的影响.pdfVIP

· 488 · 主国痘理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(3)：488—491 [文章编号] 1000—4718(2012)03—0488—04 溶血磷脂酸对上皮细胞整合素 表达的影响 许铭炎 ， 邓小玲 ， 陈锡和。， 杨利和 ， 姚小武 ， 傅玉才 (汕头大学医学院 第二附属医院口腔科 ，细胞生物与遗传学教研室 3细胞衰老实验室，广东 汕头515041) [摘 要] 目的：探讨溶血磷脂酸(LPA)在体外对整合素 31(ITGB6)表达的影响，并进一步研究LPA诱导的 活化转化生长因子 B(TGF一31)在此过程中的作用。方法：原代培养的正常人支气管上皮(NHBE)细胞接种于6 孔板中，经LPA诱导，收集细胞，分别利用RT—PCR和流式细胞术检测 ITGB6mRNA及细胞表面蛋白的表达；利用 转染有TGF—B应答性纤溶酶原激活物抑制剂 1(PAl一1)启动子片段并融合萤火虫荧光报告基因片段的转化貂肺 上皮细胞 (TMLC)作为TGF—p活性报告细胞检测活化的TGF—B。结果：(1)10tzmol／LLPA诱导2h后，ITGB6 mRNA在上皮细胞中表达显著增加 ，具有明显的时间依赖性。(2)10I~mol／LLPA诱导4h后 ，上皮细胞表面 IT． GB6蛋白表达明显增加。(3)抗ot 抗体可阻断LPA诱导的活化TGF—B，但不能阻断LPA诱导的ITGB6mRNA 的表达。结论：(1)LPA可诱导上皮细胞 ITGB6mRNA和细胞表面蛋白的表达。(2)LPA诱导的ITGB6mRNA表 达不依赖LPA诱导的TGF—B活化。 [关键词] 溶血磷脂酸；整合素p；上皮细胞；转化生长因子母 [中图分类号] R735．35 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．03．018 Effectoflysophosphatidic acid on expression ofintegrin in epithelial cells XU Ming—yan ，DENG Xiao—ling ，CHEN Xi—he ，YANG Li—he ，YAOXiao—wu ， FU Yu—cai (DepartmentofStomatology，TheSecondAj~liatedHospital，DepartmentofCellBiologyand Genetics，LaboratoryofCell Senescence，ShantouUniversityMedicalCollege，Shantou515401，China．E—mail：caseydxl@yahoo．con) [ABSTRACT] AIM ：Toinvestigatetheeffectoflysophosphatidicacid(LPA)ontheexpressionofintegrinB6(IT- GB6)fordeterminingtheroleoftransfomringgrowthfactorB (TGF—p)activationinducedbyLPAinhtisprocess． METHODS：Nomralhumanbronchialepithelial(NHBE)cellswereprimarilyculturedin6wellplatenadstimulatedwith LPA．ThemRNA expressionofITGB6andthelevelofcellsurfaceITGB6proteinweredetectedbyRT—PCR andflow cy— tometry，respectively．TheactivityofactiveTGF—BinducedbyLPAwasmeasuredbythemethodoftransfomredminklung epihtelialcells(TMLC)transfectedwithTGF—Bresponsiveplasminogenactivatorinhibitor1(PAI一1)promoterfused withfireflylucif