人膝骨关节炎血清生物学标志物的筛选.pdfVIP

· 884 · 生国痘理生理 蠢 ChineseJournalofPathophysiology 2012。28(5)：884—888 [文章编号] 1000—4718(2012)05—0884—05 人膝骨关节炎血清生物学标志物的筛选冰 曾 花 ， 蔡道章 ， 陈郁鲜 ， 曾 春 ， 叶志强 ，庄 泽 ，黎明涛 ， 胡坤华 (中山大学附属第三医院 急诊科，骨科 ，广东 广州510630；中山大学中山医学院蛋 白质组学研究中心，广东 广州510080) [摘 要] 目的：比较膝骨关节炎患者与正常人血清蛋白质组的差异，筛选其能用于骨关节炎诊断、治疗或 发病机制研究的血清生物学标志物。方法：利用双向荧光差异凝胶电泳技术比较膝骨关节炎患者血清(4例)与健 康志愿者血清(4例)蛋白图谱的差异，使用基质辅助激光解吸电离一飞行时间质谱及生物信息学相关技术对获得 的差异蛋白进行鉴定和初步分析，并用 Westernblotting进一步验证所鉴定的蛋白。结果：成功建立了骨关节炎血 清差异蛋白质组学的研究方法；通过质谱分析初步鉴定出8个差异蛋白，其中5个蛋白在膝骨关节炎组表达上调， 3个蛋白在膝骨关节炎组表达下调。Westernblotting进一步验证得到仪 一巨球蛋 白在膝骨关节炎组表达上调，与 双向荧光胶内差异凝胶电泳技术联合质谱分析的结果一致。结论 ：膝骨关节炎患者血清与正常人血清蛋 白表达 存在明显差异，其中仅：一巨球蛋白可作为骨关节炎潜在的疾病相关生物学标志物进一步研究，为骨关节炎的诊断、 治疗和发病机制的研究提供新的线索和实验基础。 [关键词] 骨关节炎；血清；生物学标记物；双向荧光差异凝胶电泳 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．05．020 Analysisofserum biomarkersinhmu ankneeosteoarthritis ZENG Hua ，CAIDao—zhang ，CHEN Yu—xian ，ZENG Chun ，YE Zhi—qiang ， ZHUANG Ze ．LIMing—tao ．HU Kun—hua (DepartmentofEmergencyMedicine2DepartmentofOrthopaedics， ThirdAffiliatedHospital，SunYat—senUnwe~ity， Guangzhou510630，China；ProteomicsResearchCenter，ZhongshanSchoolofMedicine，SunYat—senUniversity，Guang- zhou510080．China．E—mail：daozhang@medmail．corn．cn) [ABSTRACT] AIM ：Toanalyzetheproteomiecomponentsoftheserafromkneeosteoarthritispatientsandnormal people，nadtosearchproteinsthatmightserveasserum biomarkersforosteoarthritisdiagnosis，treatmentorpahtogenesis． METHODS：Two—dimensionalfluorescencedifferencegelelectrophoresis(2D—DIGE)wasappliedtoanalyzehtesera obtainedfromthepatientswithkneeosteoarthfitis(=4)nadnormalcontrols(n=4)．Thedifferentiallyexpressedpro- teinswereidentifiedbymatrix—assistedlaserdesorptionionizationtime一0f—flightmassspectrometryfMALDI—TOF— MS)．Westernblottinganalysiswas叩pliedtoconfirmhteresults．RESULTS：Comparativeproteomiedataofserumfrom