长期培养的人脐带间充质干细胞PCNA、IL-6、IL-11和galectin-3的表达.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(6)：1051—1056 · 1051 · [文章编号] 1000—4718(2012)06—1051—06 长期培养的人脐带间充质干细胞 PCNA、IL一6、IL一11和 galectin一3的表达 毛文哲 ， 许 超 ，李扬秋 ， 陈少华 ， 柳 菁 ， 刘 俊 ，廖继东 (暨南大学医学院 田家炳医学实验中心，血液病研究所，生物化学教研室，广东 广州510632) [摘 要] 目的：探讨长期培养的人脐带间充质干细胞(hUC—MSCs)增殖细胞核抗原(PCNA)、白细胞介素 一 6(IL一6)、白细胞介素一11(IL一11)和半乳糖凝集素一3(galectin一3)mRNA及蛋白表达的变化情况，为 hUC— MSCs的实验研究和临床应用提供实验资料和理论依据。方法：取剖宫产新生儿脐带，分离、传代培养 hUC— MSCs；收集第3、8、18、28和33代细胞及培养上清，用qRT—PCR、ELISA及 Westernbloting检测 PCNA、IL一6、IL一 11和galectin一3mRNA和蛋白水平。结果：(1)hUC—MSCsPCNA、IL一6、IL一11mRNA及 IL一6、IL一11蛋白的 表达随培养传代次数增加而减少，第33代较第3代分别降低了33％、56％、37％和50．3％、58．9％，差异显著(均P 0．01)。(2)各代间galeetin一3mRNA表达无显著差异(P0．05)，且各代间蛋白表达亦无明显差异。结论：(1) 体外长期传代培养过程中hUC—MSCs增殖能力和支持造血能力可能逐渐减弱甚至丧失。(2)体外长期传代培养 可能对hUC—MSCs的免疫调节功能无显著影响，这有待进一步的实验验证。 [关键词] 人脐带间充质干细胞；长期培养；增殖细胞核抗原；白细胞介素6；白细胞介素 11；半乳糖凝集 素 3 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．06．017 ExpressionofPCNA，IL 一6，IL 一11andgalectin一3inhumanumbilical cordmesenchymalstem cellsduringlong——term culture MAOWen—zhe ，XUChao ，LIYang—qiu ，CHENShao—hua，LIUJing。，LIUJun ， UAOJi—dong (死nKa-pingCenterforMedicalExperiments，InstituteofHematology，DepartmentofBiochemistry，SchoolofMedicine， ． ~nanUniversity，Guangzhou510632，China．E—mail：tliaojd@ edu．ca) [ABSTRACT] AIM ：ToinvestigatethechangesofthemRNAandproteinlevelsofproliferatingcellnuclearanti— gen(PCNA)，interleukin一6(IL一6)，IL一11andgaleetin一3inhumnaumbilicalcordmesenchymalstemceils(hUC— MSCs)duringlong—termcultureinvitro．METHODS：Humanumbilicalcordsfromneonatesviacaesarena sectionwere coilected，andthehUC—MSCswereisolatedandsub—cultured．Thecellsandculturesupernatantsatpassages3，8，18， 28and33werecollected．ThemRNA expressionandproteinsecretionofPCNA．IL一6．IL一11andgalectin一3indifferent passagesofhUC—M