西兰花多肽组分Ⅱ诱导神经胶质瘤细胞凋亡的作用及其机制研究.pdfVIP

· 1584 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2014，30(9)：1584-1589 [文章编号] 1000-4718(2014)09—1584—06 西兰花多肽组分 II诱导神经胶质瘤细胞凋亡的 作用及其机制研究水 齐 玲， 徐俊杰， 赵东海， 韩 磊， 纪朋艳 ， 王玮瑶， 吕士杰 (吉林医药学院，吉林 吉林 132013) [摘 要] 目的：探讨西兰花多肽组分 II诱导胶质瘤细胞凋亡的作用及机制。方法：培养人神经胶质瘤 SHG-44细胞，将其分为对照组以及 3、10、30和 100mg／L西兰花多肽组分 II组，MTr法检测西兰花多肽组分 II作 用后细胞活力的变化 ；AnnexinV／PI检测细胞的凋亡率；倒置显微镜观察西兰花多肽组分 II诱导细胞凋亡的形态 学变化；免疫细胞化学和Westernblotting法检测西兰花多肽组分 II作用后 Bax、Bcl-2蛋白表达，Westernblotting法 检测 caspase-3蛋白表达。结果：西兰花多肽组分 II作用SHG-44细胞24h、48h和72h时均可以降低细胞活力， 作用呈时间．剂量依赖性。AnnexinV／PI检测细胞凋亡率发现，各用药组细胞凋亡率随着药物剂量的增加而显著升 高。倒置显微镜下观察 ，西兰花多肽组分II作用SHG-44细胞72h后，各用药组细胞的密度随药物浓度升高而明 显降低 ，并可见到明显的凋亡小体。细胞免疫组织化学和 Westernblotting结果显示，药物作用SHG-44细胞72h 后 ，与对照组比较，细胞 Bax蛋 白表达呈上升趋势，Bcl一2蛋白表达呈下降趋势，各用药组Bax／Bcl-2比值均明显增 加(P0．05或P0．01)；Westernblotting检测caspase一3蛋白发现，各药物组easpase一3蛋白表达量均增加 ，与空白 对照组比较，30和 100mg／L西兰花多肽组分 II组差异有统计学意义 (P0．01)。结论：西兰花多肽组分 II可提 高神经胶质瘤细胞中Bax／Bcl-2蛋白的比值，促进caspase-3蛋白活化 ，从而诱导肿瘤细胞凋亡。 [关键词】 西兰花；神经胶质瘤 ；细胞凋亡 [中图分类号] R739．4 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000-4718．2014．09．008 EffectofcomponentIIofbroccolipolypeptideongliomacellapoptosis QILing，XUJun-jie，ZHAODong—hai，HANLei，JIPeng—yan，WANGWei—yao，LUShi— jle (JilinMedicalCollege，Jilin132013，China．E—mail：lvshjie—qr@163．com) [ABSTRACT] AIM：ToexploretheeffectofcomponentIIofbroccolipolypeptideOiltheapoptosisingliomacells． METHODS：HumangliomaSHG-44cellswereculturedanddividedintocontrolgroupand3，10，30and100mg／Leom— ponentIIofbroccolipolypeptidergoups．CellviabilitywasdetectedbyMTFassay．Theapoptoticrateswereexaminedby AnnexinV／PIstaining．Themorphologicalchangesofthecellswereobservedunderinvertedmicroscope．Theproteinex— pressionofBaxandBcl-2wasdetectedbyimmunoeytochemistryandWestern blotting．Theproteinle