转酮酶样蛋白1在人类鼻咽癌细胞生长增殖中的作用.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2009，25(3)：505—509 · 505 · [文章编号] 1000—4718(2009)03—0505—05 转酮酶样蛋白1在人类鼻咽癌细胞生长增殖中的作用 张 松 ， 杨菊红 ， 孔维佳 ， 孙 宇 (华中科技大学同济医学院附属协和医院耳鼻咽喉科，湖北 武汉430022；。武汉市血液中心检验科 ，湖北 武汉430030) [摘 要] 目的：探讨转酮酶样蛋白1(TKTL1)在体外培养的人类鼻咽癌细胞生长增殖中的作用。方法：构 建针对 TKTL1mRNA的干扰RNA质粒，转染人类鼻咽癌细胞(CNE细胞系)；检测转染前后CNE细胞 中转酮酶活 性的变化 ；实时定量RT—PCR检测转染前后CNE细胞转酮酶基因家族(TKT、TKTL1、TKTL2)mRNA表达水平的变 化；通过流式细胞术和MTT实验检测转染前后 CNE细胞增殖和细胞周期的改变。结果：实验组 CNE细胞中转酮 酶活性(携带有pEGFP—C1一U6／TKTL1)明显低于质粒对照组(携带有pEGFP—C1一U6／UC)和空白对照组(未转 染细胞)；实时定量RT—PCR结果显示转染前后 CNE细胞中TKT和 TKTL2mRNA的表达水平均无显著差异。然 而，实验组细胞中TKTL1的表达水平明显低于对照组，且实验组 CNE细胞增殖明显被抑制，癌细胞被阻滞在G。／ G。期。结论：转酮酶蛋 白TKTL1在人类鼻咽癌细胞的生长增殖中起重要作用 ，TKTL1可能成为肿瘤治疗研究的 新靶点。 [关键词] 转酮酶样蛋白1；鼻咽肿瘤；鼻咽癌细胞系；细胞周期 [中图分类号] R739 [文献标识码] A Effectoftransketolase——likeprotein1onproliferationofhumannasopha-- ryngealcarcinomacells ZHANGSong，‘YANGJu—hong，KONGWei—jia，SUNYu (DepartmentofOtolaryngology，UnionHospitalofTongfiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology， Wuhan430022，China；DepartmentofLaboratory，WuhanBloodCenter，Wuhan430030，China．E—mail：wjkong666@ yahoo．cn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectoftransketolase—likeprotein1(TKTL1)onproliferationofhuman nasopharyngealcarcinomacellsinvitro．M ETHODS：ThesiRNA againstTKTL1mRNA wasconstructedandtransfected intohumannasopharyngealcarcinomacells(CNEcellline)．Theactivityoftransketolasewasdetectedbeforeandafter RNA interference．Real—timePCRWasusedtodete ． rminethemRNAexpressionoftransketolase(TKT)genefamilyinthe CNEcells．Flow cytometryandMTYtestwereusedtodetecttheeffectofanti—TKTL1siRNA oncellproliferationandcell cycleintheCNEcells．RESULTS：Th etotaltransketolaseactivityWas significant