阻塞性黄疸对肠上皮细胞氯离子分泌影响的研究.pdfVIP

· 2194· 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2011，27(11)：2194—2198 [文章编号] 1000—4718(2011)11—2194—05 阻塞性黄疸对肠上皮细胞氯离子分泌影响的研究 陈振勇 ， 戴红梅， 杨 鹏， 王延刚， 黄文广， 冯贤松 (华中科技大学同济医学院附属协和医院综合外科 ，湖北 武汉430022) [摘 要] 目的：探讨阻塞性黄疸 (OJ)对肠上皮细胞氯离子分泌的影响。方法：建立 0J大鼠模型，分别于 胆管结扎7d(OJ1组)和 14d(OJ2组)后 ，检测实验动物外周血cl一浓度，取末端回肠上皮细胞体外培养 ，荧光分光 光度法测量细胞内Cl一浓度，全细胞膜片钳技术检测 Cl一电流的改变，并用 Westernblotting法分析电压门控氯离子 通道蛋白2(CIC一2)表达的变化。结果：OJ1组和OJ2组的血清cl一浓度分别为(88．67-4-4．68)mmol／L和(82．01 ±6．25)mmol／L，均低于对照组 (均P0．05)。细胞内c1一相对浓度 ，OJ1组 (3．14±0．38)和 OJ2组 (3．554-0．47) 均高于对照组(均P0．05)。对照组肠上皮细胞 cl一电流，从 一80mV的(一15．45±7．56)pA／pF升到 8OmV的 (5．85±0．81)pA／pF，呈外向整流趋势。oJ组cl一平均电流密度绝对值逐渐减小，与对照组比较差异显著(均P 0．05)。Westernblotting分析显示 CIC一2蛋白表达条带在90kD附近，对条带的定量分析表明，OJ1组为0．20-4 0．04，OJ2组为0．194-0．06，均低于对照组 (0．27-40．06)(均P0．05)，但 OJ1、2组间比较没有显著差异(P 0．05)。结论：OJ抑制肠腔氯离子分泌 ，缩小上皮细胞内外氯离子浓度差，减少cl一外向电流，此作用与细胞膜上 氯离子通道蛋白2的表达降低有关。 [关键词] 黄疸 ，梗塞性；肠细胞；氯化物通道 [中图分类号] R364．5 [文献标识码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2011．11．030 Effectsofobstructivejaundiceonenterocytecllloridionsecretioninrats CHEN Zhen—yong，DAIHong—mei，YANG Peng，WANG Yan—gang，HUANG Wen— guang，FENG Xian—song (DepartmentofGeneralSurgery，UnionHospital，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan430022，China． E—mail：xhczy@126．corn) [ABSTRACT] AIM：Toinvestigatetheeffectsofobstructivejaundice(OJ)onenteroeytechloridionsecretionin rats．METHODS：TheOJmodelofratswassetup．Th eratsweredividedintoOJlgroupandOJ2grouprandomly．The animalsinOJ1groupweresacrificedbyexsnaguination7daysafteroperationnadtheratsinOJ2groupweresacrificed14 daysafteroperation．TheC1一concentrationinperipheralbloodwasdetected．Th eepithelialcellsintheterminal ileum mn- cosaswereculturedinvitro．Theconcentration intraeellularCI—wasdetectedbyfluorospectrophotometry．TheC1一cur- rentwas measuredbywhole—cel