乳腺癌癌前病变与细胞凋亡的关系.pdfVIP

乳腺癌癌前病变篇 ·457· 2．细胞凋亡的重要调控基因 2．1Bel-2基因(B-cell lymphomagene) 是最早被认识的抗凋亡基因，位于18q2113染色体片段上，其基因表达产物是一种相对分子量为 26×103的蛋白，存在于线粒体膜、核膜和内质网膜上。Bcl一2是细胞程序性死亡的调控基因，该基因异 常可以阻止细胞凋亡，促进肿瘤发生发展【81。Bcl．2主要通过抑制白介素113转移酶的激活，成为多种途 径或机理诱发凋亡中的重要抑制因子，可以阻止细胞发生凋亡，并为细胞创造有利条件【9】。在人类胚胎 发生和发育的过程中，Bcl-2可能用来保证细胞的生存能力，以使其能够进一步分化成熟【l们。此外，Bcl．2 的表达延长肿瘤细胞的寿命，使肿瘤以较慢的速度生长，而其它癌基因引起肿瘤较快生长，说明Bcl-2 对上皮性肿瘤发生发展中凋亡的调控起重要作用。 2．2 p53基因 是迄今发现与肿瘤相关性最高的基因。野生型p53基因是一种重要的抑癌基因，它是细胞生长周 期中的负调节因子，在细胞周期调控、DNA损伤修复、细胞分化、凋亡和衰老等许多过程中发挥了重 要的生物学功能。当细胞中的DNA损伤或细胞增殖异常时，p53基因被激活，导致细胞周期停滞并启 动DNA修复机制，使损伤的DNA得以修复。如果DNA不能被修复，则诱导其调亡，研究发现丧失p53 功能的小鼠胸腺细胞对糖皮质激素诱导的调亡反应和正常细胞相同，而对辐射诱导的调亡不敏感。有入 认为p53是很好的肿瘤诊断标志物，可以作为癌症早期诊断的重要指标Il¨。刘旭明等【12】研究抑癌基因 p53在乳腺增生与乳腺癌中的表达相关性及其生物学意义，结果在单纯性乳腺增生、不典型增生和乳腺 癌中，p53的表达阳性率分别为0．15％、52．1％，认为p53的失活与乳腺癌的发生有密切关系。 的影响，结果中药抗增汤能够降低实验大鼠乳腺组织BcL．2、PCNA的表达水平，认为抗增汤能够通过 抑制细胞增殖，诱导凋亡和抑制血管生成来实现抑制大鼠乳腺增生的作用。 3．细胞凋亡的检测 3．1细胞色素C的定位检测 属于凋亡早期检测。细胞色素C作为一种信号物质，在细胞凋亡中发挥着重要的作用。正常情况 下，它存在于线粒体内膜和外膜之间的腔中，凋亡信号刺激使其从线粒体释放至细胞液，结合Apaf-1 (apoptoticproteaseactivating subunit coxidase 1V： 后者再激活caspase-3和其它下游caspase。细胞色素C氧化酶亚单位IV(cytochrome COX4)是定位在线粒体内膜上的膜蛋白，凋亡发生时，它保留在线粒体内，因而它是线粒体富集部分 FractionationKit不用超离心，可从凋亡和非凋亡细胞中快速 的一个非常有用的标志。ApoAlertTMCell 胞色素C和COX4的存在位置，从而判断凋亡的发生。 3．2 transferase-mediateddUTP TUNEL(Terminal deoxynucleotidyl nick-end—labeHng) 多种标记方法，直接荧光标记，地高辛介导荧光标记或过氧化物酶联显色，可做细胞悬液、福尔马林固 定或石蜡处理的组织、细胞培养物等多种样本的检测。其中，直接标记步骤少，操作简便。而间接标记 有信号放大的作用，检测灵敏度高。 我们以往进行过莪术油干预治疗二甲基苯丙葸诱导乳腺癌癌前病变SD大鼠的研究，结果显示活血 化瘀类中药莪术油能够有效预防、治疗乳腺癌癌前病变，通过上调细胞凋亡因子Fas、FasL表达，下调 bcl．2表达作用以促进细胞凋亡，但其调节机制是否有其他基因的参与或受到某些基因的直接调控还有待 迸一步的研究。 4．乳腺癌癌前病变与细胞凋亡的研究拓展中医药治疗前景 目前研究应借助现代细胞分子生物学的先进研究方法和手段，致力于对中医药在癌前病变干预治疗 ·458· 乳腺癌癌前病变篇 的价值和机理进行评估和研究，为乳腺癌的防治开辟一个新的领域。尽管对