p38MAP激酶在山冈橐吾碱肝细胞毒性中作用.pdfVIP

中国药理学与毒理学杂志 ２００７年８月； ２１（４）：２７８－２８２ 　　 　 ·２７８· ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ ２００７　　Ａｕｇ； ２１（４）：２７８－２８２ ｐ３８ＭＡＰ激酶在山冈橐吾碱肝细胞毒性中的作用 １，２ １，２ 季莉莉 ，王峥涛 （１．上海中医药大学中药研究所中药标准化教育部重点实验室，上海　２０１２０３； ２．上海中药标准化研究中心，上海　２０１２０３） 摘要：目的　探讨丝裂原活化蛋 白激酶 ｐ３８ 物鹿蹄橐吾（ＬｉｇｕｌａｒｉａｈｏｄｇｓｏｎｉｉＨｏｏｋ．）中分离得到 （ｐ３８ＭＡＰ激酶 ）在山冈橐吾碱肝细胞毒性中的作 的ｏｔｏｎｅｃｉｎｅ型肝毒性吡咯里西啶生物碱，橐吾属部 用。方法　采用Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交方法观察山冈橐吾碱 分药用植物的根及根茎在民间习称为山紫菀或川紫 －１ （１００ ｍｏｌ·Ｌ ，分别作用１，５，１５，３０及６０ｍｉｎ） 菀，常用来代替紫菀（ＡｓｔｅｒｔａｔａｒｉｃｕｓＬ．ｆ．），治疗咳 μ －１ 对ｐ３８ＭＡＰ激酶激活的影响；１０ ｍｏｌ·Ｌ ｐ３８ＭＡＰ 嗽、肝炎和其他炎症，并收入四川、云南等省的地方 μ 激酶抑制剂 ＳＫＦ８６００２预处理 １５ｍｉｎ后，分别观察 标准。 －１ 其对山冈橐吾碱（１００ ｍｏｌ·Ｌ ）诱导ｐ３８ＭＡＰ激酶 到目前为止，关于山冈橐吾碱毒性作用分子机 μ 磷酸化（３０ｍｉｎ，Ｗｅｓｔｅｒｎ杂交法）及细胞毒性（ＭＴＴ 制的研究并不多见。早期的研究报道山冈橐吾碱具 法，３６及４８ｈ；台盼蓝染色法，３６ｈ）的影响。结果 有致癌、致突变的毒性作用［１－３］。近来有研究发现， －１ Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果显示，１００ ｍｏｌ·Ｌ 山冈橐吾碱明 山冈橐吾碱在体内可以形成与谷胱甘肽和ＤＮＡ结 μ 显诱导ｐ３８ＭＡＰ激酶的磷酸化激活，５～３０ｍｉｎ时 合的代谢产物［４－５］。本实验室前期的实验研究发 处于较高水平；ＳＫＦ８６００２预处理可以明显抑制山 现，山冈橐吾碱在体外可以强烈地抑制人正常肝Ｌ 冈橐吾碱诱导的ｐ３８ＭＡＰ激酶磷酸化；ＭＴＴ染色法 ［６］ ０２细胞的生长 。进一步的实验观察发现，山冈橐 和台盼蓝染色实验均发现ＳＫＦ８６００２预处理能部分 吾碱的毒性作用可能与其诱导丝裂原活化蛋白激酶 降低山冈橐吾碱诱导的肝细胞毒性〔ＭＴＴ，３６ｈ： ｐ３８（ｐ３８ＭＡＰ激酶）的磷酸化和半胱氨酸天冬氨酸 （０．２１０±０．００８）ｖｓ（０．１７０±０．００３），４８ｈ：（０．３３± 蛋白酶（ｃａｓｐａｓｅ）３的活化有关［７－８］。ｐ３８ＭＡＰ激酶 ０．０３）ｖｓ（０．２００±０．００３）；台盼蓝染色（８０±２）％ 的磷酸化激活究竟在山冈橐吾碱诱导的肝细胞毒性 ｖｓ（７２±７）％；ｎ＝８，Ｐ＜０．０５〕。结论　ｐ３８ＭＡＰ 过程中起多大作用，还是只是细胞对外源刺激的应 激酶可能参与了山冈橐吾碱诱导的肝细胞毒性作 激反应？本研究通过观察 ｐ３８ＭＡＰ激酶抑制剂 用。 ＳＫＦ８６００２对山冈橐吾碱诱导的ｐ３８ＭＡＰ激酶的磷 关键词：山冈橐吾碱；肝细胞；ｐ３８ＭＡＰ激酶 酸化及肝细胞毒性的影响，进一步阐明ｐ３８ＭＡＰ激