高效液相色谱DAD检测器程序可变波长检测方法的研究.pdfVIP

662 【研究报告】 [文章编号]1004—8685(2000)06—0662—02 高效液相色谱DAD检测器程序可变波长检测方法研究 刘 奋 林奕芝 戴京晶 梁 伟 (广东深圳市福田区卫生防疫站 518033) [中图分类号]0652．63 [文献标识码]A 本文以测定人工合成色素为例介绍一种利用二极管阵列 4．1 程序可变波长的优化 检测器(DAD)特有的程序可变波长功能。根据各组分的出峰 由文献n3及三维图谱扫描可得到5种人工合成色素的最 顺序，在不同时间段分别用各组分的最佳吸收波长进行检测的 佳吸收波长见表2。 方法。此法不但可以提高检测灵敏度，同时还能克服梯度洗脱 表1 测定人工合成色素的程序波长 时的基线漂移，减小共存物的干扰。 1 原理 多组分物质通过液相色谱分离，利用DAD检测器特有的 程序可变波长功能，在同一检测通道，在各组分的出峰时间区 问分别用其最佳检测波长进行检测，保留时间定性，峰面积定 量。 2实验部分 2．1仪器 色 素 最佳吸收波长 HPll00高效液相色谱仪：四元梯度泵，在线真空脱气机， 柠檬黄 428土2nm 自动进样器，柱温箱，二级管阵列检测器(DAD)，HPll00化 苋菜红 520士2nm 学工作站。 胭脂红 508±2nm 2．2试剂 日落黄 482士2nm 人工合成色素标准溶液：柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落 亮 蓝 630士2nm 黄、亮蓝为国标液GBW(E)100001～5，安瓿装，1．0mg／ml， 我们利用DAD的程序可变波长进行检测，即在不同时间 用纯水稀释混合为浓度各50tlg／ml的混合标准溶液，0．45btm 可用不同的检测波长检测。根据5种色素的不同出峰时间，在 滤膜过滤。 其出峰时间段内，选用其最佳吸收波长为检测波长进行测定， 甲醇：液相色谱纯 具体程序见表1，色谱图见图1。 0．02mol／L乙酸铵溶液：分析纯，称取1．549，用纯水稀 释至1000ml，0．45tLm滤膜过滤。 2．3 色谱条件 州 色谱柱：HypersilODS5t_￡m，125mm×4mm 流动相：甲醇+0．02mol／L乙酸铵 ∞ ∞ 梯度洗脱：甲醇：初始10％，3．00min后至30％，5．00min 删艏“ 、 后至70％，保持lmin。 4撇28nmn520鼽nm…攀 柏