高效液相色谱法测定果酒中有机酸.pdfVIP

454 史堕卫生堕壁盘查2堂笙!旦整!!鲞筻!塑￡堑!!堕垫!世笪旦型虫坠鲍曼也!!堑虹!烛垫塑：皇2盥坠13：№：兰 【测定方法l [文章编号]1004．-8685(2003)04454-02 高效液相色谱法测定果酒中的有机酸 陈文华，张呖。李鑫 (哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生检验学教研室，黑龙江 150001) 0657．7t2 C中图分类号)R155．5 【文献标识码]A 有机酸广泛存在于水果、蔬菜中，它能使食品具有～定的 溶液．结果用lnemiem 风味、质地和色泽，具有防腐和抗氧化作用。以科学方法酿造 分分离效果较好，保留时间适宜。 而成的果酒中，古有丰富的维生素、有机酸及含氮物质，其中 2．2流动相的选择 有机酸能维持果酒的pH值，使果酒口味鲜美、清凉透明。目 2．2．1种类的选择使用不同流动相能使色谱峰得到更好分 前，有机酸的测定方法有酸碱滴定法…I、旋光法[1]1、气相色谱 离。根据参考文献【4I我们分别选用o．5％磷酸氢二镀(pH= 法Ⅲ，高效液相色谱法【1‘71等。其中酸碱滴定法、旋光法所需 费用较低，但影响因素较多，准确度差；气相色谱法中常因酸 (pH=2．5)作流动相，测定同一标准混合溶液。能使有机酸结 的沸点较高、不易气化而需要先对其衍生再进行测定，方法繁 果很好分离，避免样品中杂质的干扰。 琐；高效液相色谱法灵敏简便，样品不需前处理，可直接测定， 22．2 pH值的选择分别配制pH为2．0、2．5、3．0、3．5、4．0、 因此更快捷和准确。本实验采用反相ODS色谱拄，磷酸溶液 5．0的磷酸溶液，并以其作为流动相，测定同一标准溶液。结 作流动相，测定果酒中的有机酸，并对测试条件进行了研究， 果随着pH的增大，两种酸的保留时间不断接近。为使组分更 建立了一种简便、准确的分析方法。 好分离和保护色谱柱，选用pH=2,5的磷酸溶液最适宜。 1材料与方法 2．3标准色谱图在最佳色谱条件下，分析有机酸标准液，乳 酸、酒石酸、柠檬酸结果的保留时间分别为8345、4．893、 1，1仪器日本岛津Lc一6A高效液相色谱仪：紫外一可见 13．490min。见图1。 光光度检测器sPD一6AV；C—B3A数据处理器；JY88一II型超 声波细胞粉碎机；SPN—IOA数字酸度计。 1．2试剂磷酸(AR)；酒石酸(AR)；乳酸(JUt)；甲醇(AR)；磷 酸氢二钠(AR)；磷酸二氢钾(Art)；磷酸氢二铵(AR)；柠檬酸。 1 3溶液的配制 1．3．1流动相的配制 (1)0．01mol／L磷酸溶液的配制取1．15ml磷酸溶液，用 超纯水定容至1000rnl．用磷酸氢二钠调节pH至25，超声波脱 气后备用。 (2)0．5％磷酸氢二铵溶液的配制准确称取1．50％磷酸 氢二铵，用超纯水定容至300ml，用磷酸调节pH至2．5，超声波 图1标准色谱图 脱气后备用。 2．4标准曲线 (3)2md／L磷酸2-氢钾溶液的配制准确称取8．1659磷 2．4-．1酒石酸标准曲线分别配制0．05、O．1、0．3、0．5、0．7、 酸二氢钾。用超纯水定容至300M，用磷酸调节pH至2．5，超声 0．9e／L的标准溶液，在最佳色谱条件下，取5m分别进样，测定 波脱气后备用。 峰面积，结果酒石酸的线性范围为0．05—09％／L，回归方程Y 1．3．2标准溶液的配制 ；12370+65528X(r=O．9953)。 (1)酒石酸标准储备液准确称取10．0009酒石酸放人