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的RPMI一1640培养基中,于37C.CO,含量5%,湿度90%的宫颈癌和子宫体癌而列居第三位。但因卵巢癌致死者,却占各
CO,培养箱中培养。至对数生长期时观察细胞形态并离心收集 类妇科肿瘤的首位,对妇女生命造成严重威胁。其原因在于卵
细胞,待用。 巢癌临床无症状,鉴别其组织类型及良、恶性困难,在治疗上
1.2.2细胞分组将上述细胞按5×l04个细胞/ml的浓度主要采用顺铂,阿霉素等化疗药物,这些药物在杀伤肿瘤细胞
重悬于RPMl一1640培养基中,接种千96孔培养板,并将细胞的同时,也会影响正常细胞的代谢,因此寻找副作用小,疗效
随机分为空白对照组(以生理盐水代替槲皮素),槲皮素组 好,价格低廉的药物成为卵巢癌治疗中的一个重要突破口。
(槲皮素终浓度为50um01/L),每组设5个复孔,分别培养 槲皮素是一种具有多种生物学活性的黄酮类化合物,广
12h、24h、36h和48h。培养过程中采用倒置相差显微镜观察泛分布于被子植物的花叶部分,资源丰富,无毒无味。研究发
细胞形态并拍照。 现槲皮素具有多种药理作用,能抑制人肝癌细胞、人淋巴瘤细
1.2.3细胞活性检测依据参考文献口’,采用四氮唑盐 胞,人白血病细胞、人宫颈癌细胞等多种肿瘸细胞的增殖生长
(MTT)还原法捡测细胞活性。分别于加入药物12h、24h、口J,但尚无槲皮素对卵巢癌细胞系作用的桕关研究。本课题在
前期研究的基础上HJ,用浓度为50Hmol/L的槲皮素作用于卵
36h和48h后再加入MTT溶液(5mg/m1)20ul,继续培养44,
时.吸出培养液,每孔加入200ul二甲亚砜震荡lOmin后,用全巢癌细胞株,结果表明桷}皮素对卵巢癌细胞株SKOV3的生长
自动酶标仪490nm波长下测定各孔的吸光度(A值),并计算具有抑制作用.且其作用强度与作用时间成正比。根据相关文
细胞生长抑制率。 献,辫皮素可能通过以下作用机制发挥其抗癌作用临一:1、通
细胞生长抑制率(%)=l一(实验组A值÷空白孔A值)×过抗氧化及清除自由基等机制抑制致癌、促癌剂;2、通过作
100%。 用于肿瘤细胞中信号传递过程中的一些激酶发挥抗癌作用。
1.2.4实验数据处理所得结果以均值±标准差表示,组3.诱导肿瘤细胞凋亡;4.抑制RNA聚合酶活性;5、影响细
问和组内比较采用F+q检验,p0.05为差异有显著性。所有胞周期。槲皮素是否也通过上述机制抑制9p巢癌细胞的生长尚
for
处理均在SPssl5.0windows统计软件包中进行。 有待于在本实验的基础上进一步深入研究。
2.实验结果 本研究建立了槲皮素抑制卵巢癌细胞生长的细胞模型,为
2.1形态学观察 槲皮素应用于卵巢癌的临床治疗提供了实验资料和理论依据,
倒置显微镜下,空白对照组SKOV3细胞呈单层生长,多通过深入研究和进行相关临床实验,有望为卵巢癌治疗寻找一
角形或短梭形,胞核圆形或椭圆形,胞浆透亮,部分细胞内可 类新药物。
见分泌颗粒;槲皮素组细胞胞体变长,胞浆透明度下降,细胞 参考文献
S,Gonzalez-GaUegoJ,Culebras
膜皱缩,细胞边界模糊。颗粒感增强,部分细胞胞突回缩变 【l】Martinez-Florzs
JM。et and
圆,脱落呈悬浮状,可见细胞碎片。 a1.Ftavono
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