抗Fas抗体诱导软骨细胞凋亡和胰岛素样生长因子1对其的保护作用.pdfVIP

生坐骨科莹盎2Q盟至!!H第趣立拦山兰盥chtn!Q韭b鲤：墅堕!盟ber20盟，y丑21：丛!．!! ·基础研究· 抗Fas抗体诱导软骨细胞凋亡 及胰岛素样生长因子一1对其的保护作用 王拥军 施杞 周泉 孙鹏 李晨光 周重建 吕维加 梁智仁 f摘要】 目的建立抗Fas抗体诱导大鼠终板软骨细胞凋亡模型，榆测胰岛素样牛K因子一1(1n_ 叫lm-like gmwl}lfac∞卜1，IGF．1)是吾青延缓软骨细胞凋亡的作用，并进一步了解软骨细胞中整合素B1 adhesion 和黏着斑激酶(focaI kina3e，FAK)的表达情况。方法取大鼠颈椎软骨终板软骨细胞行体外培 养，应用抗ns抗体(500n卧Id)雨f人重组IGF_1(50ng，m1)处理。光学显微镜观察细胞形态，透射电子显 微镜、TuNEL法观察软骨细胞捅亡形惫，免疫细胞化学法椅测Bax、Bcl一2表达，实时荧光定量聚合酶链 反应、免疫细胞化学和we时emblo￡法检测整合索B1和FAK的基因与蛋白表达。结果体外培养出软 骨纲胞并维持其表型。抗Fas抗体诱导软骨细胞发生捌亡。TUNEL染色证明软骨细胞凋亡市升高，透射 屯镜检查发现典型凋亡小体。与正常组比较，诱导凋L组Bcl一2表达降低而Bax表达升高，整台素Bl 和FAK的基因与蛋白表达明显下调；抗Fa吕抗体与IGF一1联合干预后，Bcl一2表达刀高而B姒表达降 低，整合索B1和FAK的基圉与蛋白表达明显上捌。结论抗F。s抗体呵涛导怍外培养的终板软骨细胞 凋亡，抗Fas抗体与iGr—J联合应用，能延缓软骨细胞凋L的过程，维持软骨细胞的功能。 【关键词】软骨细胞；细胞狮亡；胰岛素样生长因子I induced ofjnslllin一Ⅱke f卵tor—l ch呻drocyteapopto对s byanⅡ一F舔anubody明dprevenⅡon growth invitro刚M yo增jM^s肼如朋O“Q“眠eE吐^¨趣乱“e巧却i谗，默衄甜艟如如e甥舻!}耐i— oE。n以C*ineje胁拯^ne，5^帆井面2删2，吼机o Invnm 【Abs仃act】0bjective jnvestiga【i佃chondmcyte8apop【oslshy明tj—FasanLibody—indIIced incmtmed trea㈣ntw{th endpl咖c11011dwcy嗡and汕e岫r insulin-lih即wthfact咿lⅡcF—I)blocked thesee艉cLs．卟e 0fthextracellularmatnl andfocal出he∞onkinase expressl0上1 pmteinsmt。grin—p1 with also Ratcervjcal (FA目inconj唧tion investigated．Methods apoptos诂was endpl“【e(hondm。ytes and an￡i—Fas wPreculturedtreatedwith antibodv．wi出{}r”￡houthuman㈨’mhin＆n{IGF一1．Cellular1110P wereevaluafe《l wase㈣ned transmissione1(1c帅nml- ph0109y byl培htnljc“Js∞pyApoptoticch叽ges hy ofB缸and