土垅大白蚁菌圃多糖提取工艺的研究.pdfVIP

中国中医药科技2012年7月第 19卷第4期 July2012Vo1．19No．4 ·339 · 土垅大 白蚁菌圃多糖提取工艺的研究 苏 青 黄岛平 黄瑞松 黄 静’ 黄彩色 (。广西壮族 自治区民族医药研究院 ·南宁530001 广西分析测试研究中心 ·南宁530022 广西中医学院2007级本科实习生 ·南宁530001) 摘 要 目的：研究土垅大白蚁茵圃多糖的最佳提取工艺条件。方法：以多糖得率为评价指标，比较提取 方式及提取溶剂对茵圃多糖提取效果的影响，应用正交实验法对土垅大白蚁苗圃多糖提取_T-艺条件进行 优化。结果：水提醇沉法较适宜土垅大 白蚁菌 圃多糖 的提取，多糖最佳提取工艺条件为：提取温度 100℃、料液比1：10、提取3次(每次 1小时)。在此条件下多糖平均得率为3．75％，RSD=1．58％。结论： 水提醇沉法工艺稳定、简单、可行，易于工业化生产及推广。 主题词 土垅大白蚁／分析 茵圃多糖／分离和提纯 中药制药工艺 土垅大 白蚁菌圃多糖 (以下简称 “菌圃多糖”)系昆虫纲 定其吸收度。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准 等翅 目白蚁科动物土垅 大 白蚁 Macrotermesannandalei 曲线。葡萄糖溶液浓度在5—30．O ／ml与吸光度值呈 良 (slivestej)蚁巢的主要活性成分，具有提高机体免疫功能等 好线性关系，其 回归方程为 Y=0．02(Mx+0．0000，r= 作用n]。白蚁菌圃的药用始见于 《本草纲 目》】，在广西壮 0．9992。 族地区常用于治疗虚咳，慢性支气管炎，哮喘等症”。关于 2．1．2 换算因子测定 取精制的菌圃多糖 (用五氧化二磷 白蚁菌圃多糖提取工艺的报道却鲜有报道，为加快广西壮药 干燥至恒重)适量，精密称定，加水使溶解，制成每 1ml含 土垅 白蚁菌圃的应用与开发 ，本实验进行了土垅 白蚁菌圃多 0．01mg的溶液，摇匀，备用。精密吸取该溶液 1．0ml，置 糖提取工艺的研究，报告如下。 10ml具塞刻度试管中，按 “2．1．1标准曲线制备项下”自“加 1 实验材料 入5％苯酚溶液 1．0ml……”起，同法操作 ，测定多糖吸光度， UV一2401PC可见紫外分光光度计：日本 岛津公司； 按下式计算换算因子f。f=w／(C ·D)，W：多糖重(P．g)，C： XS205BDU1／10 电子分析天平：瑞士梅特勒公司；LXJ—II 葡萄糖浓度 (g／m1)，D：稀释 因素，得 f=1．08，RSD％ = 型离心沉淀机 ：上海医用分析仪器；SB3200DTS型双频超声 1．70。 洗涤器：宁波新芝生物科技股份有限公司。 2．1．3 样品含量测定 取菌圃多糖粉末约0．1g(n=3)，精 土垅大白蚁菌圃(以下简称菌圃)：2003—04采集于广 密称定 ，加水使溶解，制成每 lIll含0．Inag的溶液。精密吸取 西南宁市郊 ，其蚂蚁兵蚁经广西大学动物科技学院潘红平副 该溶液 1．0ml于 10ml具塞试管中，照上述 “2．1．1”项下 自 教授鉴定为土垅大 白蚁胍 annandalei(Shvestri)。D一葡萄 “加5％苯酚试液 1．0rid……”起，同法操作，测定吸光度。根 糖：中国医药集团上海化学试剂有限公司，含量t99％；D一 据回归方程计算多糖总含量。 半乳糖：国药集团化学试剂有限公司，含量 ≥99％；D一木 多糖含量 (％)=CE~／W ×l0o 糖：国药集团化学试剂有限公司 ，含量199％；其余试剂均为 式中C：供试品溶液的浓度 ( m1)；D：供试 品溶液的 分析纯。 稀释因素；f：换算因子；w：供试品重量( )。 2 方法与结果 2．2 茵圃多糖的TLC分析 称取本品多糖样品约20mg