三叶青黄酮对肺癌A549细胞生长抑制和MAPKs通路关系的研究.pdfVIP

中国药理学通报　 Chinese Pharmacological Bulletin　 2014 Jan;30(1):101~4 ·101· 网络出版时间:2013-12-20 06:19　 网络出版地址:http:/ / / kcms/ detail/ 34.1086.R0619.022.html 三叶青黄酮对肺癌A549细胞生长抑制与MAPKs通路关系的研究 1 2 钟良瑞 ,魏克民 (1.浙江中医药大学附属省立同德医院肿瘤科,浙江杭州　 310053;2.浙江省中医药研究院,浙江杭州　 310007) doi:10.3969/ j.issn.1001-1978.2014.01.022 细胞促凋亡及其作用机制具有可行性,为三叶青进 文献标志码:A 文章编号:1001-1978(2014)01-0101-04 一步开发研究提供理论依据。 中国图书分类号:R284. 1;R329. 24;R329. 25;R734．2; 1　 材料 R979．1 1.1　 细胞株　 A549 细胞株由浙江省医学科学院提 摘要:目的　 探讨三叶青黄酮对人非小细胞肺癌A549 细胞 供,浙江中医药大学细胞实验室培养传代,实验所用 增殖抑制、凋亡作用及其机制。 方法　 采用 CCK-8 检测三 为生长状况良好的细胞。 叶青黄酮对 A549 细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜观察 1.2　 药品与试剂　 三叶青:购自浙江省中医药研究 Hoechst33258染色的细胞凋亡形态变化;流式细胞仪检测 院,由浙江省中药新药研发重点实验室提取制备;RP- 细胞凋亡率;Western blot 法检测 p-p38、p-ERK,p-JNK蛋白 表达变化。 结果　 体外实验 CCK-8检测显示三叶青黄酮各 MI 1640培养液:杭州吉诺生物医药技术有限公司; 浓度组作用不同时间点细胞的抑制率比较,差异有显著性; Hyclone胎牛血清;CCK-8:日本同仁化学研究所;Ho- 呈剂量、时间依赖性。 荧光显微镜观察经 Hoechst 33258染 echst33258染色液:碧云天生物技术研究所;Annexin 色的细胞凋亡形态变化,显示细胞减少,细胞核改变和凋亡 V-FITC细胞凋亡检测试剂盒:南京凯基生物技术有 小体形成。 流式细胞仪检测结果显示细胞凋亡率呈明显的 限公司;p-p38、p-ERK、p-JNK:美国CST公司。 量-效关系。 Western blot法检测表明三叶青黄酮可以上调 1.3　 仪器　 3111型CO 细胞培养箱:美国Thermo 2 A549细胞中p-p38和p-ERK蛋白表达,且与浓度呈正相关。 公司;3001型酶标仪:美国Thermo公司;IX71型荧 结论　 三叶青黄酮对人非小细胞肺癌 A549 细胞具有明显 光显微镜:日本 OLYMPUS公司;流式细胞仪:美国 抑制增殖,促进凋亡作用,其机制可能与激活p38MAPK途径 BD公司;蛋白印记检测系统:美国Bio-Rad公司。 和ERK途径有关。 2　 方法 2.1　 细胞培养　 细胞培养液含 10%胎牛血清的 关键词:三叶青;人肺癌细胞;凋亡;MAPKs通路;p38MAPK;