AKTA explorer 100蛋白质快速纯化工艺开拓系统使用体会.pdfVIP

! 旦：堕 Science end Technology Innovation Herald 学 术 论 坛 AKTA explorer100蛋白质快速纯化工艺开拓系统使用 体会 苏伟明 马润娣 (广东海洋大学海洋药物实验室 广东湛江 524025) 摘 要 ：AKTA Explorer 1OO蛋 白质快速纯化工艺开拓系统是美 国通用电器公司生产的分离纯化蛋 白质以及棱酸等生物大分子的装置 。 我室使用该 系统先后分离纯化 了福安泰一03和重组福安泰一03，在使用过程 中碰到了一些 问题并积累了一些经验 。 关键词 ：使用 快速纯化开拓系统 体会 中图分类号 ：R284 文献标识码 ：A 文章编号 ：1674—098X(2011)02(c)一0248—0I AKTA Explorer tOO蛋白质快速纯化 目标蛋 白与杂蛋 白在L／3柱体积后才被洗 洗；使用一段时间后 ，用lmol／L NaOH对系 工艺开拓系统是美 国通用电器 (GE)公司(原 脱 ，首 1／3*2体 积的洗 脱液将洗 脱凝胶 介 统进行消毒 。 瑞典安玛西亚公司)生产的分离纯化蛋白 质分子 量范 围以上 的大 蛋 白，而最后 l／3 质以及核酸等生物大分子 的装置 。可 以选 柱体积则洗脱盐等小分子 。解决方法 ：上 6阀IV-908，PV-908，INV-907出现故障 用离子交换(Ion Exchange，IEX)、凝胶过滤 样5％柱体积样品后洗脱1／3柱体积可 以上 (1)阀不能转换 。检查对泵的连接 。此阀 (chromatographyFechange，GF)、疏水相互 第二次5％柱体积样品，洗脱3／2柱体积后 ， 应连接UniNet 2插座，不是UniNetI插座。 作用 (HydrophobicInteraction Chroma- 上第三次5％样 品，可大大缩短纯化时间及 检查 阀上 的ID一转换 ，ID数字应与UNI— tography media，HIC)、亲和层析 (Affinity 增加处理量 。 C0RN设置的数字相当。检查连接电缆 ，如 Chromatography，AC)和反向层析(Reversed 需则更换之 。 PhaseChromatography，RPC)等不同分 4pH曲线对pH变化无响应5[] (2)此 阀转换到错误位置。此阀零件在 离原理的柱填料来实现生物大分子的分离 (1)电极玻璃膜可能破碎。如破碎 ，更换 更换后装配的不正确。检查分配板标志i／o 纯化。该系统内使用隋性气体管道，环境温 电极 。 或3是否水平的。如是外部泄漏 ，检查管件 和，减少对蛋白质活性的影响。能用于纯化 (2)pH响应缓慢或不能校准 。检查电极 连接 ，如需则更换之 ；如是 阀内部泄漏，在 工艺的全新开发和优化工作 ，该系统能设 玻璃膜。如玻璃膜变于 ，将电极浸在电极缓 阀体下边 的小孔能够检测 内部泄漏。按照 定方法 自动运行 ，分析纯化通量大 ，有三个 冲液 中过夜 ，电极可恢复 ；如玻璃膜受污 有关阀的说 明的4节更换通道板和分配板 光吸收检测点，分离样品能 自动分部收集 染，按照MonitorpH／C